[发明专利]LAMP检测玉米MIR162的引物组、试剂盒及方法

权利要求书

1.一种用于检测转基因玉米MIR162品系的LAMP引物组，所述引物由外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP和环引物LB组成，所述引物的碱基序列分别为SEQ ID No：1~5。

2.一种用于检测转基因玉米MIR162品系的LAMP检测试剂盒，其特征在于：含有权利要求1所述引物组。

3.一种用于检测转基因玉米MIR162品系的LAMP检测方法，其特征在于：包括使用权利要求1所述引物组或者权利要求2所述试剂盒的步骤。

4.权利要求3所述检测转基因玉米MIR162品系的LAMP检测方法，其特征在于，以样品基因组DNA为模板，利用权利要求1所述引物组或者权利要求2所述试剂盒进行等温扩增，反应结束后用荧光染料SYBR Green I显色，结果判定。

5.权利要求4所述检测转基因玉米MIR162品系的LAMP检测方法，其特征在于，所述PCR扩增中的反应体系为25 μL，即在0.2 mL的PCR反应管中加入：10×ThermoPol缓冲液2.5 μL、10 μmol/L的外引物F3溶液0.5 μL、10 μmol/L的外引物B3溶液0.5 μL、40 μmol/L的内引物FIP溶液1 μL、40 μmol/L的内引物BIP溶液1 μL、40 μmol/L的环引物LB溶液1 μL、5 mM甜菜碱4 μL、10 mM dNTPs 4 μL、100 mmol/L MgSO₄ 1 μL、8U/μL Bst DNA聚合酶1 μL、基因组DNA溶液2 μL、6.5 μL超纯水，混匀后在PCR管盖内壁加1000×SYBR Green I溶液 2 μL；等温扩增反应条件为：63℃恒温反应 90 min。

6.权利要求3所述检测转基因玉米MIR162品系的LAMP检测方法，其特征在于，所述结果判定是荧光染料SYBR Green I显色后扩增产物呈绿色即作为检出转基因玉米品系MIR162。