[发明专利]恶臭假单胞菌的PCR检测用引物及检测方法有效
| 申请号： | 201410135105.8 | 申请日： | 2014-04-04 |
| 公开（公告）号： | CN103898221A | 公开（公告）日： | 2014-07-02 |
| 发明（设计）人： | 耿庆华;王芳;王金玲;张莹;林颖 | 申请（专利权）人： | 中华人民共和国沈阳出入境检验检疫局 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 110000 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 恶臭 假单胞菌 pcr 检测 引物 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种恶臭假单胞菌的PCR检测用引物，其特征在于，所述引物的核苷酸序列为：
序列1：5' -CTG CAT CAT GGC CGG TGA CAA CAT TT- 3'
序列2：5' -GTC GCA TGG CTG TCG GTC TTC AGA TC-3'。
2.一种恶臭假单胞菌的PCR检测方法，其特征在于，包括下列步骤：
1）将权利要求1中的引物、待检菌液的DNA模板与PCR扩增用的含Mg2+的PCR缓冲液、dNTP、Taq DNA聚合酶混合，配制得PCR反应体系；
2）将上述的PCR反应体系置于PCR仪上，按照预定扩增条件进行扩增；
3）扩增结束后，利用电泳检测扩增片段从而断定结构。
3.按照权利要求2所述恶臭假单胞菌的PCR检测方法，其特征在于，所述扩增条件为：94 ℃预变性1min；94 ℃变性15s，61℃退火15s，72 ℃延伸15s，进行30个循环；72 ℃延伸5min。
4.按照权利要求2所述恶臭假单胞菌的PCR检测方法，其特征在于：所述电泳检测为凝胶电泳检测。
5.按照权利要求4所述恶臭假单胞菌的PCR检测方法，其特征在于，所述凝胶电泳检测具体为：3～5V/cm恒压电泳，电泳50～60min。
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