[发明专利]一种检测结核分枝杆菌复合群的引物对及其应用有效
申请号: | 201410111291.1 | 申请日: | 2014-03-24 |
公开(公告)号: | CN103882130A | 公开(公告)日: | 2014-06-25 |
发明(设计)人: | 朱宝利;张卫红;孙照刚;苗慧芳;刘飞;张瑞芬 | 申请(专利权)人: | 中国科学院微生物研究所;北京旷博生物技术有限公司;首都医科大学附属北京胸科医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/32 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100101 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 结核 分枝杆菌 复合 引物 及其 应用 | ||
1.用于检测或辅助检测结核分枝杆菌复合群的引物对,其特征在于:所述引物对为由序列表中序列1和序列2所示的两条单链DNA分子组成的引物对。
2.根据权利要求1所述的引物对,其特征在于:组成所述引物对的两条单链DNA分子的摩尔比为1:1。
3.用于检测或辅助检测结核分枝杆菌复合群的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒含有权利要求1或2所述的引物对、dNTP和DNA聚合酶。
4.制备权利要求1或2所述引物对的方法,包括将组成所述引物对的两条单链DNA分子分别单独包装的步骤。
5.制备权利要求3所述试剂盒的方法,包括如下步骤:将组成所述引物对的两条单链DNA分子分别单独包装后,与如下物质包装于同一个试剂盒内:dNTP和DNA聚合酶。
6.权利要求1或2所述引物对,或权利要求3所述的试剂盒在检测或辅助检测结核分枝杆菌复合群的非疾病诊断目的的应用,或在制备检测或辅助检测结核分枝杆菌复合群的产品中的应用。
7.利用权利要求1或2所述引物对,或权利要求3所述的试剂盒检测待测样本中是否含有结核分枝杆菌复合群的非疾病诊断目的的方法,包括如下步骤:
(1)从待测样本中提取DNA作为模板,采用权利要求1或2所述的引物对进行PCR扩增,得到PCR产物;
(2)根据步骤(1)所得PCR产物的大小,按照如下方法确定待测样本中是否含有结核分枝杆菌复合群:若PCR产物中含有大小为344bp的DNA片段,则所述待测样本中含有或候选含有结核分枝杆菌复合群;若PCR产物中不含有大小为344bp的DNA片段,则所述待测样本中不含有或候选不含有结核分枝杆菌复合群。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:在步骤(1)中,进行所述PCR扩增时采用的退火温度为56℃。
9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于:所述大小为344bp的DNA片段的核苷酸序列为序列表中序列3所示。
10.根据权利要求1-9中任一所述的引物对或试剂盒或方法或应用,其特征在于:所述结核分枝杆菌复合群为如下中的至少一种:结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌。
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