[发明专利]用于测定蓝细菌毒素的存在或不存在的方法和试剂盒

权利要求书

1.一种测定样品中环肽和生物碱蓝细菌毒素的存在或不存在的方法，其包括步骤：

在包含弱阳离子交换树脂和弱阴离子交换树脂的固相提取设备上制备潜在包括环肽和生物碱蓝细菌毒素的水样品，以形成保留或浓缩的毒素样品，

使所述保留或浓缩的毒素样品在流动相中洗脱或重构，以形成样品提取物；

将所述样品提取物置于在41.37-103.4 MPa（6,000-15,000磅/英寸²）的压力下用具有1-3微米平均粒度的颗粒装填的层析柱头上，以形成潜在包括环肽或生物碱蓝细菌毒素的保留样品，如果所述样品提取物包含此种蓝细菌毒素的话；

在有机溶剂的梯度下从所述层析柱中洗脱来自潜在包括环肽或生物碱蓝细菌毒素的所述保留样品的化合物，以形成包括环肽或生物碱蓝细菌毒素的至少一种洗脱的化合物，如果所述样品提取物包含此种蓝细菌毒素的话；和

将潜在包括环肽或生物碱蓝细菌毒素的所述洗脱的化合物置于质谱仪中以形成质谱，并且由所述质谱测定所述蓝细菌毒素的存在或不存在。

2.权利要求1的方法，其中所述质谱仪形成蓝细菌毒素的一种或多种片段，并且所述片段的所述光谱用于鉴定且测定所述蓝细菌毒素的存在或不存在。

3.权利要求1或2的方法，其中将所述样品提取物置于层析柱头上，洗脱且将所述蓝细菌毒素置于质谱仪中的所述步骤在小于15分钟的时间段内执行。

4.权利要求1的方法，其中所述粒子选自桥接乙基杂化物和高强度硅石。

5.权利要求1的方法，其中所述粒子具有小于2微米的平均直径。

6.权利要求1的方法，其中所述样品提取物通过在所述弱阴离子交换树脂上提取生物碱蓝细菌毒素形成。

7.权利要求1的方法，其中所述样品提取物通过在所述弱阳离子交换树脂上提取环肽蓝细菌毒素形成。

8.权利要求1的方法，其中所述固相提取设备具有包括聚合物二乙烯基苯-N-乙烯吡咯烷酮共聚物的粒子。

9.一种用于就环肽和生物碱蓝细菌毒素的存在或不存在执行样品分析的试剂盒，其包括：

用于校准且促进通过质谱法鉴定一种或多种环肽和生物碱蓝细菌毒素的标准，

用于形成样品提取物的样品制备设备，其中所述设备包含弱阳离子交换树脂和弱阴离子交换树脂，

柱，其用于使所述样品提取物的化合物分离和在应用梯度后释放所述蓝细菌毒素，如果存在的话，从而使得所述蓝细菌毒素释放至质谱仪用于鉴定。

10.权利要求9的试剂盒，其中所述柱用具有1-3微米的平均粒度的颗粒装填。

11.权利要求10的试剂盒，其中所述粒子具有选自桥接乙基杂化物和高强度硅石的层析表面。

12.权利要求11的试剂盒，其中所述柱具有41.37-103.4 MPa（6,000-15,000磅/英寸²）的操作压力。