[发明专利]利用自制菌液进行布品加速降解的检测方法及其使用的实验装置

说明书

技术领域

本发明及一种布品加速降解的检测方法及其实验装置，具体地说是一种自制菌液进行布品加速降解的检测实验及其实验装置。 

背景技术

根据GBT 22047-2008,ISO 17556-2003、诸葛健，唐是雯.工业微生物实验技术手册[M].中国轻工业出版社：1994和杨汝德，吴虹，林晓珊.现代工业微生物实验技术[M].科学技术出版社：2009所指导进行菌液加速降解实验，其实验的菌液培育缓慢、筛选不精，普通的实验装置在进行布品实验时，实验装置内的布品因为没有被很好的固定，所以加速降解过程中会皱折、卷缩或粘合等，因而对后续检测的数据会产生一定的影响。 

发明内容

本发明目的提供利用自制菌液进行布品加速降解的检测方法及其使用的实验装置。 

本发明的技术解决方案是具体按照以下步骤实施： 

步骤1，土壤采集；

在所用的天然土壤从田地和/或森林，取离地面5-15cm处土壤表层，或已经预曝置的土壤，用小铲子除去表土，收集的土约10g，盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，标好，记录采样时间、地点、环境条件信息，以备查考；

步骤2，土壤处理；

过筛土壤，以获得尺寸小于2mm的土壤微粒，并去除明显的植物材料、石头和其他惰性材料；将约20克新鲜的泥土去除明显的杂质物后，至于底部置有脱脂棉的三角形漏斗中，采用去离子蒸馏水200毫升淋洗，对淋洗液采用2000r/min离心后，采用pH计测试其pH 值，三次平行测试结果取均值；

步骤3，Ⅰ代富集；

称取处理好的土壤样品10g，加入已装有90mL营养肉汤的250mL三角瓶里，于37℃士2℃下，150-200r/min，摇床振荡培养18-24h，得I代土壤细菌混合菌群液；

步骤4，Ⅱ代富集；

用移液器移取1mL第I代混合菌群液到装有100mL营养肉汤的250mL三角瓶里，于37℃士2℃下，150-200r/min，摇床振荡培养18-24h，得II代土壤细菌混合菌群液；

步骤5，降解试样的制备；

从每种样品上选取有代表性的试样，裁剪试样规格：250×50mm，裁剪试样数量为18件；所有试样使用前需在115℃下高温高压灭菌20min；

步骤6，试样及试验液装进实验装置；

准备实验装置，洗净烘干，用封口膜包扎封住实验装置，在121℃下高温高压灭菌15min，使其在使用前保持无菌状态；在高温灭菌过的实验装置中各加入试样15件，同时加入试验液350mL，封口膜包扎封住实验装置开口处，于115℃下灭菌20min，为降解实验装置；

步骤7，生物接触作用；

用移液器移取1mL试验菌群液加入上述降解实验装置，封好实验装置开口处；将所有降解实验装置置于37℃士2℃下，150-200r/min，摇床振荡培养18-24h后，常温下静置；每3天取样后置于37℃士2℃下，150-200r/min，摇床振荡1h，再常温下静置；

步骤8，降解过程取样；

降解过程中，用高温灭菌的镊子，将试样从降解实验装置中取出，试样用蒸馏水冲洗4遍，于40-50℃电热鼓风干燥箱中干燥后，冰箱保存，以备分析测试；每种试样每次取3个平行样，每3天取样一次；以备降解材料性能参数之测试。

所述营养肉汤为1.5g的MgSO₄，1g的CuSO₄，0.2g的MnSO₄，0.3g的Fe SO₄·7H₂O，1g的CaCl₂。 

所述营养肉汤为1.5g的K₂HPO₄·3H₂O，1g的KH₂PO₄，0.2g的MgSO₄·7 H₂O，0.5g的NH₄NO₃，0.03g的CaCl₂，0.03g的FeCl₃，0.5L去离子水，pH7.5。