[发明专利]制备富含虾青素奇数脂肪酸一酯的虾青素一酯的方法

权利要求书

1.一种制备富含虾青素奇数脂肪酸一酯的虾青素一酯的方法，其特征在于：步骤为：

（1）制备南极磷虾虾油：取南极磷虾，用六号汽油提取,得粗提取油，再用丙酮提取粗提取油，得南极磷虾虾油；

（2）虾青素一酯的提取；

（3）奇数脂肪酸一酯的分离：取上述制备的虾青素一酯20mg，溶解在1.5ml二氯甲烷中，得虾青素一酯溶液，取0.5ml，用毛细点样管在AgNO₃高效薄层板上将其点成线，然后放在加有24ml展开剂的玻璃层析缸内展开；展开后取出晾干，可见虾青素一酯被展开呈2条带，从上至下依次为：①第一条红色带Rf为0.41；②第二条黄色带Rf为0.36；将2条带刮下，放入盛有二氯甲烷的试管中，将试管放在40KHz、200～500W功率下超声3～10分钟，然后在4000～6000r/min下离心，取上清液，重复以上提取过程3～5次至刮下的条带无色，分别得到2条带各自对应的提取液，旋转蒸发除去二氯甲烷，得到2种样品，第一条红色带为含7～9％虾青素十三烯酸一酯和48～51％虾青素十五酸一酯的虾青素一酯；第二条黄色带为含100％偶数虾青素脂肪酸一酯的虾青素一酯。

2.根据权利要求1所述的制备富含虾青素奇数脂肪酸一酯的虾青素一酯的方法，其特征在于：所述步骤（1）（2）具体如下：

（1）制备南极磷虾虾油：取南极磷虾，在35℃～65℃下通风干燥至恒重，粉碎至20目，用六号汽油在30℃下提取3次，每次1h，油料液比为1：6,得粗提取油，再用丙酮在30℃下提取粗提取油3次，每次0.5h，料液比为1：5，得南极磷虾虾油；

（2）虾青素一酯的提取：将68g200～300目的GF₂₅₄硅胶置于干燥箱中120℃活化12h，然后用石油醚溶解装柱，备用；按体积比依次为石油醚：乙酸乙酯=10：1，9：1，8：1，7：1，6：1，5：1，4：1，3：1,2：1,1：1的比例配制洗脱液各500mL，备用；

取2ml上述制备的南极磷虾虾油进样，先用100ml石油醚进行淋洗，再用体积比依次为石油醚：乙酸乙酯=10：1，9：1，8：1，7：1，6：1，5：1，4：1，3：1,2：1,1：1的洗脱液进行淋洗，收集体积比为石油醚：乙酸乙酯=3：1,2：1,1：1的洗脱液，合并，旋转蒸发除去石油醚和乙酸乙酯，所得产品即为虾青素一酯。

3.根据权利要求1所述的制备富含虾青素奇数脂肪酸一酯的虾青素一酯的方法，其特征在于：所述步骤（1）（2）按照公开号为CN102746205A的专利申请中的方法进行。

4.根据权利要求1所述的制备富含虾青素奇数脂肪酸一酯的虾青素一酯的方法，其特征在于：所述AgNO₃高效薄层板是通过以下方法制备得到的：将薄层层析硅胶板H在质量浓度为1～2.5％的AgNO₃甲醇溶液中浸泡4～16分钟，取出，晾干0.5～2.5小时，再放入干燥箱中45～85℃烘0.5～1.5小时，即得。

5.根据权利要求1所述的制备富含虾青素奇数脂肪酸一酯的虾青素一酯的方法，其特征在于：所述展开剂是由体积比为9.5ml:3ml：10μl的石油醚、丙酮和三乙胺混合而成。

6.根据权利要求1所述的制备富含虾青素奇数脂肪酸一酯的虾青素一酯的方法，其特征在于：所述对样品进行检测的方法为：从2个样品中各取5mg，各加入0.5ml体积百分数为7％的浓硫酸甲醇溶液，60℃水浴加热15分钟，冷却后加1ml正己烷，振荡，静置5分钟后取上清液于2ml小试管中，通风橱挥发10h至成为固体甲酯化样品；然后将制备的甲酯化样品溶解在正己烷中，在Alilent6890GC-5973MS气质联用色谱仪上检测：色谱柱#1，Agilent 19091N-213:1538.60580HP-INNOWaxPolyethyleneGlyco，初始温度60℃，压力8.3239psi，流速1ml/min,平均速度36.966cm/s,滞留时间1.3653分钟，运行时间43分钟。