[发明专利]一种酶法生产的氨基葡萄糖及其制备方法无效
申请号: | 201410067600.X | 申请日: | 2014-02-27 |
公开(公告)号: | CN103865969A | 公开(公告)日: | 2014-06-18 |
发明(设计)人: | 彭楠;梁运祥;王林春 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12P19/26 | 分类号: | C12P19/26 |
代理公司: | 武汉凌达知识产权事务所(特殊普通合伙) 42221 | 代理人: | 宋国荣 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 氨基 葡萄糖 及其 制备 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种酶法生产的氨基葡萄糖及其制备方法,属单糖生产技术领域。
背景技术
氨基葡萄糖是一种天然的氨基单糖,是糖胺多糖(粘多糖)的前体,而后者是关节软骨的主要成分,所以氨基葡萄糖常被用于骨关节炎的辅助治疗。补充氨基葡萄糖可能可以帮助重建软骨并治疗关节炎。
目前,氨基葡萄糖主要是以浓盐酸在高温下水解壳聚糖进行生产,该方法以壳聚糖为原料,采用2~3倍的盐酸作为水解剂,3~5小时85~95℃高温水解。此方法的缺点有许多,例如: 1)产物是氨基葡萄糖盐酸盐,而非氨基葡萄糖单体;2)生产周期长;3)高浓度的盐酸会在一定程度上破坏产品;4)水解条件比较剧烈,需要消耗大量的能源;5)残留的盐酸不仅对人体有害,还会对设备,环境造成危害。虽然有人致力于改变这个生产方法,例如在加盐酸的时候加入0.5%~2%的草酸,但其没有从实质上改变这种生产方法,缺点依然很突出。
发明内容
本发明的目的是提供一种酶法生产的氨基葡萄糖及其制备方法,该氨基葡萄糖为氨基单糖,有利于人体吸收,无副作用,整个反应过程都是在模拟还原生物体内的反应,因此无任何副产物产生,也无有毒物质积累;制备中无需添加强酸,少量冰醋酸对人体无害;用生物酶作为催化剂,生产成本大大降低;生产工序简单,产品质量稳定;生产周期短,能耗少;酶解液无有害物质,产品绿色环保,无环境污染。
本发明酶法生产的氨基葡萄糖的技术方案是:它是以壳聚糖为底物,加入水和冰醋酸形成胶体,再加入壳聚糖内切酶和壳聚糖外切酶酶解,酶解完成后除去蛋白,然后干燥该酶解液获得氨基葡萄糖,该氨基葡萄糖为氨基单糖。
本发明酶法生产的氨基葡萄糖制备方法技术方案,所述方法步骤包括:
A、将壳聚糖放入反应器中,边搅拌边加入水,定容至一定浓度;
B、溶胀后边搅拌边加入冰醋酸使其形成一定PH值的均匀胶体;
C、形成均匀胶体后,加热反应器到合适温度;
D、在反应器中加入壳聚糖内切酶和壳聚糖外切酶;
E、保持合适温度一定时间,直到酶解充分;
F、酶解充分后,除去酶,并且获得酶解液;
G、将酶解液进行干燥,获得氨基葡萄糖。
在上述方案基础上进一步的技术方案是:
第一个进一步的技术方案,所述酶法生产的氨基葡萄糖制备方法,其步骤是:
A、取壳聚糖放置于反应器中,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为0.5%~30%;
B、溶胀充分后,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.1~1,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;
C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为30~60℃;
D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为0.3×104~3×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为 1×104~5×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为0.06~3;
E、加酶后保持温度30~60℃,经2~5小时使反应充分,使其单糖得率在70%~90%之间;
F、反应完成后,将反应器温度上升至80~100℃,保持5~10min,使酶解液中的酶蛋白变性析出,再对酶解液进行离心,除去变性酶蛋白和反应残渣并获得酶解液;
G、将酶解液喷雾干燥,获得粉状氨基葡萄糖。
第二个进一步的技术方案,酶法生产的所述氨基葡萄糖制备方法,其步骤是:
A、取100g的壳聚糖放置于反应器中,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为0.5%;
B、溶胀充分后,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.2,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;
C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为50℃;
D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为2×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为 5×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为0.4;
E、加酶后保持温度50℃,经4小时使反应充分,使其单糖得率在85%±5%;
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