[发明专利]一种酶法生产的氨基葡萄糖及其制备方法无效

专利信息
申请号: 201410067600.X 申请日: 2014-02-27
公开(公告)号: CN103865969A 公开(公告)日: 2014-06-18
发明(设计)人: 彭楠;梁运祥;王林春 申请(专利权)人: 华中农业大学
主分类号: C12P19/26 分类号: C12P19/26
代理公司: 武汉凌达知识产权事务所(特殊普通合伙) 42221 代理人: 宋国荣
地址: 430070 湖*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 一种 生产 氨基 葡萄糖 及其 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种酶法生产的氨基葡萄糖,其特征是,以壳聚糖为底物,加入水和冰醋酸形成胶体,再加入壳聚糖内切酶和壳聚糖外切酶酶解,酶解完成后除去蛋白,然后干燥该酶解液获得氨基葡萄糖,该氨基葡萄糖为氨基单糖。

2.一种权利要求1所述的氨基葡萄糖制备方法,其特征是,包括下述步骤:

A、将壳聚糖放入反应器中,边搅拌边加入水,定容至一定浓度;

B、溶胀后边搅拌边加入冰醋酸使其形成一定PH值的均匀胶体;

C、形成均匀胶体后,加热反应器到合适温度;

D、在反应器中加入壳聚糖内切酶和壳聚糖外切酶;

E、保持合适温度一定时间,直到酶解充分;

F、酶解充分后,除去酶,并且获得酶解液;

G、将酶解液进行干燥,获得氨基葡萄糖。

3.根据权利要求2所述氨基葡萄糖制备方法,其特征是,步骤为:

A、取壳聚糖放置于反应器中,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为0.5%~30%;

B、溶胀充分后,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.1~1,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;

C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为30~60℃;

D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为0.3×104~3×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为 1×104~5×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为0.06~3;

E、加酶后保持温度30~60℃,经2~5小时使反应充分,使其单糖得率在70%~90%之间;

F、反应完成后,将反应器温度上升至80~100℃,保持5~10min,使酶解液中的酶蛋白变性析出,再对酶解液进行离心,除去变性酶蛋白和反应残渣并获得酶解液;

G、将酶解液喷雾干燥,获得粉状氨基葡萄糖。

4.根据权利要求2所述氨基葡萄糖制备方法,其特征是,步骤为:

A、取100g的壳聚糖放置于反应器中,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为0.5%;

B、溶胀充分后,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.2,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;

C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为50℃;

D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为2×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为 5×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为0.4;

E、加酶后保持温度50℃,经4小时使反应充分,使其单糖得率在85%±5%;

F、反应完成后,将反应器温度上升至90℃,保持7min,使酶解液中的酶蛋白变性析出,再对酶解液进行离心,除去变性酶蛋白和反应残渣并获得酶解液;

G、将酶解液喷雾干燥,获得粉状氨基葡萄糖。

5.根据权利要求2所述氨基葡萄糖制备方法,其特征是,步骤为:

A、取1kg的壳聚糖放置于反应器中,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为1 %;

B、溶胀充分后,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.25,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;

C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为60℃;

D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为3×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为3×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为1;

E、加酶后保持温度50℃,经4小时使反应充分,使其单糖得率在80%±5%;

F、反应完成后,将反应器温度上升至85℃,保持10min,使酶解液中的酶蛋白变性析出,再对酶解液进行离心,除去变性酶蛋白和反应残渣并获得酶解液;

G、将酶解液喷雾干燥,获得粉状氨基葡萄糖。

6.根据权利要求2所述氨基葡萄糖制备方法,其特征是,步骤为:

A、取2kg的壳聚糖放置于反应器中,以800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为25 %;

B、溶胀充分后,以800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.8,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;

C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为50℃;

D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为3×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为4×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为0.75;

E、加酶后保持温度50℃,经4小时使反应充分,使其单糖得率在75%±5%;

F、反应完成后,将反应器温度上升至80℃,保持10min,使酶解液中的酶蛋白变性析出,再对酶解液进行离心,除去变性酶蛋白和反应残渣并获得酶解液;

G、将酶解液喷雾干燥,获得粉状氨基葡萄糖。

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