[发明专利]一种酶法生产的氨基葡萄糖及其制备方法无效
申请号: | 201410067600.X | 申请日: | 2014-02-27 |
公开(公告)号: | CN103865969A | 公开(公告)日: | 2014-06-18 |
发明(设计)人: | 彭楠;梁运祥;王林春 | 申请(专利权)人: | 华中农业大学 |
主分类号: | C12P19/26 | 分类号: | C12P19/26 |
代理公司: | 武汉凌达知识产权事务所(特殊普通合伙) 42221 | 代理人: | 宋国荣 |
地址: | 430070 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生产 氨基 葡萄糖 及其 制备 方法 | ||
1.一种酶法生产的氨基葡萄糖,其特征是,以壳聚糖为底物,加入水和冰醋酸形成胶体,再加入壳聚糖内切酶和壳聚糖外切酶酶解,酶解完成后除去蛋白,然后干燥该酶解液获得氨基葡萄糖,该氨基葡萄糖为氨基单糖。
2.一种权利要求1所述的氨基葡萄糖制备方法,其特征是,包括下述步骤:
A、将壳聚糖放入反应器中,边搅拌边加入水,定容至一定浓度;
B、溶胀后边搅拌边加入冰醋酸使其形成一定PH值的均匀胶体;
C、形成均匀胶体后,加热反应器到合适温度;
D、在反应器中加入壳聚糖内切酶和壳聚糖外切酶;
E、保持合适温度一定时间,直到酶解充分;
F、酶解充分后,除去酶,并且获得酶解液;
G、将酶解液进行干燥,获得氨基葡萄糖。
3.根据权利要求2所述氨基葡萄糖制备方法,其特征是,步骤为:
A、取壳聚糖放置于反应器中,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为0.5%~30%;
B、溶胀充分后,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.1~1,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;
C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为30~60℃;
D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为0.3×104~3×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为 1×104~5×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为0.06~3;
E、加酶后保持温度30~60℃,经2~5小时使反应充分,使其单糖得率在70%~90%之间;
F、反应完成后,将反应器温度上升至80~100℃,保持5~10min,使酶解液中的酶蛋白变性析出,再对酶解液进行离心,除去变性酶蛋白和反应残渣并获得酶解液;
G、将酶解液喷雾干燥,获得粉状氨基葡萄糖。
4.根据权利要求2所述氨基葡萄糖制备方法,其特征是,步骤为:
A、取100g的壳聚糖放置于反应器中,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为0.5%;
B、溶胀充分后,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.2,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;
C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为50℃;
D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为2×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为 5×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为0.4;
E、加酶后保持温度50℃,经4小时使反应充分,使其单糖得率在85%±5%;
F、反应完成后,将反应器温度上升至90℃,保持7min,使酶解液中的酶蛋白变性析出,再对酶解液进行离心,除去变性酶蛋白和反应残渣并获得酶解液;
G、将酶解液喷雾干燥,获得粉状氨基葡萄糖。
5.根据权利要求2所述氨基葡萄糖制备方法,其特征是,步骤为:
A、取1kg的壳聚糖放置于反应器中,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为1 %;
B、溶胀充分后,以100~800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.25,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;
C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为60℃;
D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为3×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为3×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为1;
E、加酶后保持温度50℃,经4小时使反应充分,使其单糖得率在80%±5%;
F、反应完成后,将反应器温度上升至85℃,保持10min,使酶解液中的酶蛋白变性析出,再对酶解液进行离心,除去变性酶蛋白和反应残渣并获得酶解液;
G、将酶解液喷雾干燥,获得粉状氨基葡萄糖。
6.根据权利要求2所述氨基葡萄糖制备方法,其特征是,步骤为:
A、取2kg的壳聚糖放置于反应器中,以800rpm的搅拌速度边搅拌边加入水,使壳聚糖溶胀,并使壳聚糖浓度为25 %;
B、溶胀充分后,以800rpm的搅拌速度边搅拌边加入冰醋酸,冰醋酸与壳聚糖的比值V/W为0.8,搅拌至壳聚糖形成均匀的胶体,最终使PH<7;
C、形成均匀胶体后,加热反应器至温度为50℃;
D、再加入壳聚糖内切糖和壳聚糖外切酶,壳聚糖内切糖与壳聚糖的比值U/kg为3×104;壳聚糖外切酶与壳聚糖的比值U/kg为4×104;壳聚糖内切糖与壳聚糖外切酶的加入比值为0.75;
E、加酶后保持温度50℃,经4小时使反应充分,使其单糖得率在75%±5%;
F、反应完成后,将反应器温度上升至80℃,保持10min,使酶解液中的酶蛋白变性析出,再对酶解液进行离心,除去变性酶蛋白和反应残渣并获得酶解液;
G、将酶解液喷雾干燥,获得粉状氨基葡萄糖。
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