[发明专利]一种以流感病毒为载体的HCV嵌合疫苗及其制备方法

权利要求书

1.一种重组病毒，该病毒按照如下方法制备：

将分别含有冷适应、减毒流感病毒的PB2基因、冷适应、减毒流感病毒的PB1基因、冷适应、减毒流感病毒的PA基因、冷适应、减毒流感病毒的NP基因、冷适应、减毒流感病毒的M基因和冷适应、减毒流感病毒的NS基因的表达质粒，以及分别含有靶标流感病毒的HA基因和靶标流感病毒的NA基因的表达质粒共转染宿主细胞，培养得到重组流感病毒；

其中，在所述冷适应、减毒流感病毒的NS基因的开放读码框的自5’末端起第375位至第376位核苷酸之间插入HCV的结构蛋白基因，所述HCV的结构蛋白基因与所述冷适应、减毒流感病毒的NS基因的开放读码框的自5’末端起第375位核苷酸之间连有5’-UAAUG-3’序列；

或，将所述冷适应、减毒流感病毒的M基因的开放读码框的自5’末端起第223位核苷酸至第760位核苷酸替换为HCV的结构蛋白基因；

或，将所述靶标流感病毒的NA基因的开放读码框的自5’末端起第184位核苷酸至第1253位核苷酸替换为HCV的结构蛋白基因；

所述HCV的结构蛋白基因如SEQ ID No.1所示；

所述冷适应、减毒流感病毒为冷适应、减毒A型流感病毒；

所述冷适应、减毒A型流感病毒为冷适应、减毒流感病毒株A/Ann Arbor/6/60；

所述靶标流感病毒为A型流感病毒，所述靶标A型流感病毒为流感病毒株A/California/07/2009。

2.根据权利要求1所述的病毒，其特征在于：所述宿主细胞为MDCK、Vero、293T、COS细胞或MDCK/293T、MDCK/COS共培养的细胞。

3.根据权利要求1或2所述的病毒，其特征在于：所述HCV的结构蛋白基因插在所述冷适应、减毒流感病毒的NS基因的开放读码框的自5’末端起第375位至第376位核苷酸之间所得序列为SEQ ID No.2中第51-1466位核苷酸所示；

所述HCV的结构蛋白基因是将所述冷适应、减毒流感病毒的M基因的开放读码框的自5’末端起第223位核苷酸至第760位核苷酸替换所得序列为SEQ ID No.3中第40-1053位核苷酸所示；

所述HCV的结构蛋白基因将所述靶标流感病毒的NA基因的开放读码框的自5’末端起第184位核苷酸至第1253位核苷酸替换所得序列为SEQ ID No.4中第35-944位核苷酸所示。

4.由权利要求1-3任一所述的病毒制备得到的嵌合疫苗。

5.权利要求1-3任一所述的病毒在制备预防和/或治疗流感病毒和/或HCV引起的疾病的产品中的应用；

所述流感病毒为A型流感病毒，所述A型流感病毒为H1亚型或H2亚型；

所述HCV为1型HCV；

所述1型HCV为1b亚型HCV。

6.权利要求4所述的嵌合疫苗在制备预防和/或治疗流感病毒和/或HCV引起的疾病的产品中的应用；

所述流感病毒为A型流感病毒，所述A型流感病毒为H1亚型或H2亚型；

所述HCV为1型HCV；

所述1型HCV为1b亚型HCV。