[发明专利]赛庚啶半抗原、抗原及其制备方法和应用有效
| 申请号: | 201410018901.3 | 申请日: | 2014-01-16 |
| 公开(公告)号: | CN104792989A | 公开(公告)日: | 2015-07-22 |
| 发明(设计)人: | 温凯;王照鹏;王战辉;吴小平;贾良曦;秦誉;王进;苏丽芳;覃丹凤;曾江龙;殷缓缓;陈银辉 | 申请(专利权)人: | 北京维德维康生物技术有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/577 | 分类号: | G01N33/577;G01N33/531 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 100095 北京市海淀区北清路*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 赛庚啶 半抗原 抗原 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种赛庚啶半抗原,为式Ⅰ所示产物:
式Ⅰ。
2.式Ⅰ所示产物的制备方法,包括如下步骤:
将3.3g赛庚啶,7.49g的氯碳酸乙酯和17mL甲苯中的混合物回流3.5小时;冷却后,将反应混合物用盐酸和水洗涤,然后干燥并浓缩;用正己烷处理,得到浅黄色结晶,重结晶,将残余物固化从乙醇中,得到微黄色针状结晶;产物加入50ml水,加入氢氧化锂(一水) 8.36g,pH试纸检测pH=10以上;室温水解反应3h以上;用乙酸乙酯100ml萃取,萃取水解反应水相一到两次,除去杂质,再用5mol/L的盐酸调pH值到4左右,用乙酸乙酯萃取,旋干得到半抗原CHD-OCL。
3.一种赛庚啶抗原,是将式Ⅰ所示产物和载体蛋白偶联得到的偶联物。
4.权利要求3所述赛庚啶抗原的制备方法,包括如下步骤:
(1)取CHD-OCL 31.7mg溶于3mlDMF中;
(2)加入1ml0.01MPBS助溶,加入EDC 38mg,NHS 38mg,室温活化2h;
(3)取载体蛋白100mg溶于10ml的0.1M碳酸氢钠溶液中,将活化物在4℃冰水浴条件下,加入到蛋白中,4℃搅拌反应过夜;
(4)置1L0.01M PBS中透析8次,得全抗原CHD-OCL-BSA;
(5)分装,于-20℃保存备用。
5.权利要求3所述赛庚啶抗原在制备赛庚啶特异性抗体中的应用。
6.应用权利要求3所述赛庚啶抗原制备得到的特异性抗体。
7.权利要求1所述产物、权利要求3所述赛庚啶抗原、权利要求6所述抗体在检测赛庚啶中的应用。
8.应用权利要求1所述产物、权利要求3所述赛庚啶抗原、权利要求6所述特异性抗体制备得到的酶联免疫检测试剂盒。
9.权利要求8所述酶联免疫检测试剂盒,其特征在于,它包括:包被有赛庚啶抗原的酶标板、酶标抗体工作液、赛庚啶系列标准品、底物显色液、终止液、浓缩复溶液、浓缩洗涤液。
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