[发明专利]一种新型隐球菌检测试剂盒有效
| 申请号： | 201410017251.0 | 申请日： | 2014-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN103740832A | 公开（公告）日： | 2014-04-23 |
| 发明（设计）人： | 戴立忠;张操昊;邓中平 | 申请（专利权）人： | 湖南圣维尔医学检验所有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 北京聿宏知识产权代理有限公司 11372 | 代理人： | 吴大建;欧颖 |
| 地址： | 410012 湖南省长*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 新型 球菌 检测 试剂盒 | ||
1.一种核酸释放剂在新型隐球菌检测中的应用，所述核酸释放剂包含莎梵婷（surfactin）0.01～0.5mmol/L，氯化钾20～300mmol/L，十二烷基磺酸钠0.01～2%和乙醇0.05～1%。
2.一种新型隐球菌CN-DNA检测试剂盒，所述试剂盒中包括核酸释放剂和PCR反应液，所述核酸释放剂包含莎梵婷（surfactin）0.01～0.5mmol/L，氯化钾20～300mmol/L，十二烷基磺酸钠0.01～2%和乙醇0.05～1%；所述PCR反应液中包含用于CN-DNA检测的引物和探针序列如下，
CN-DNA上游引物：TGGACTTGGATTTGGGTGTTT，
CN-DNA下游引物：GGTAATCACCTTCCCACTAACACAT，
CN-DNA探针：CTGCAAAGGACGTCGGCTCGCC。
3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括内标，且所述PCR反应液中还包含用于检测内标的引物和探针序列，
内标：AGTGAAGACTTACACAAGCCTGGGCAAGTTAGCGTACAACTACCCGGTACTAACTATGTTGGGCCTGGCAATGAGCTACAAGCTGGGCCCCCGCAAAGTGCTGTTGACAGTGCTGCAAGGATTCA；
内标上游引物：TGAAGACTTACACAAGCCTGGG，
内标下游引物：TGAATCCTTGCAGCACTGTC，
内标探针：ACTACCCGGTACTAACTATGTTGGGCCTG。
4.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中还包括酶混合液，所述酶混合液中包含耐热DNA聚合酶（Taq酶）和0.5～2U/μl的尿嘧啶DNA糖基化酶（UNG酶），同时在所述PCR反应液中还包含dUTP。
5.根据权利要求2～4中任意一项所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中包括核酸释放剂、内标、PCR反应液、酶混合液、CN定量参考品、CN阳性对照、CN阴性对照和CN浓缩液。
6.一种新型隐球菌CN-DNA检测试剂盒，所述试剂盒中包括PCR反应液，所述PCR反应液中包含用于CN-DNA检测的引物和探针序列如下，
CN-DNA上游引物：TGGACTTGGATTTGGGTGTTT，
CN-DNA下游引物：GGTAATCACCTTCCCACTAACACAT，
CN-DNA探针：CTGCAAAGGACGTCGGCTCGCC。
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