[发明专利]一种应用于鲍鱼、海参养殖的地衣芽孢杆菌微生态制剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种应用于鲍鱼、海参养殖的制剂，具体是由地衣芽孢杆菌制成的制剂在促进鲍鱼、海参的生长，提高鲍鱼、海参免疫力，防治鲍鱼、海参疾病，提高饲料转化率或净化养殖水质中的应用。

背景技术

2006年底在全国爆发的大菱鲆药残事件给我们敲响了警钟。欧盟已于2006年全面禁止抗菌药作为饲料添加剂在养殖中的应用。为保证食品安全，美国等发达国家对肉类、海产品等抗菌药残留进行检测。随着中国加入世贸组织，名优产品出口被普遍看好。但由于国内养殖不科学使用抗生素等有害药物的现象严重，大大限制了产品的出口。开发抗菌药替代产品应用于养殖业是目前市场所需要的。

发明内容

本发明的目的是提供一种促进鲍鱼、海参的生长，提高鲍鱼、海参免疫力，防治鲍鱼、海参疾病，提高饲料转化率或净化养殖水质的制剂，该制剂由地衣芽孢杆菌制成。

本发明制剂的制备优选是通过下述步骤实施的，但不局限于此制备工艺，公知的能实现的制备工艺均可以：采取含地衣芽孢杆菌的样品，然后将样品置于灭菌瓶内，4℃保存，研究时从中取一定量样品加入18mL灭菌的稀释液中，充分混匀，在无菌操作台内，进行10^-1、10^-2、10^-3、10^-4，10^-5，10^-6，10^-7梯度稀释，取10^-5，10^-6，10^-7三个稀释梯度，分别涂布于地衣芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基上，置于培养箱内，30℃下培养48小时，选择长势良好的单菌落分别接种于地衣芽孢杆菌液体扩增培养基中，置于培养箱内，30℃下扩增培养48小时。将所得培养液离心(12000rpm)分离出菌体后，将菌体冷冻真空干燥，调制出各菌种的干燥菌粉，然后根据《伯杰细菌鉴定手册》、相关细菌鉴定文献或16S rRNA序列对比分析进行地衣芽孢杆菌菌种鉴定和毒性试验，将无毒性的地衣芽孢杆菌干燥菌粉按需要比例添加粘合剂、沸石粉等辅料制成颗粒剂、片剂、胶囊、散剂、粉剂或液体制剂等各种剂型，或制成兽药、饲料添加剂或水质净化剂，也可加入其他活菌或低聚果糖等低聚糖起到协同作用。

地衣芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基优选但不局限于：纯化水1L，蛋白胨10.0g，牛肉浸膏3.0g，NaCl5.0g，琼脂25.0g，调pH7.2，121℃，灭菌15分钟。

地衣芽孢杆菌液体扩增培养基优选但不局限于：纯化水1L，蛋白胨5.0g，酵母粉1.0g，柠檬酸铁0.1g，氯化钠19.45g，氯化镁5.98g，硫酸钠3.24g，氯化钙1.8g，氯化钾0.55g，碳酸钠0.16g，溴化钾0.08g，氯化锶0.034g，硼酸0.022g，硅酸钠0.004g，氟化钠0.0024g，硝酸钠0.0016g，磷酸氢二0.008g，调pH7.4，121℃，灭菌15分钟。

为进一步具体说明本发明，发明人利用上述方法通过地衣芽孢杆菌选择性单菌落分离固体培养基分离鉴定出了无毒性的地衣芽孢杆菌，本发明所述地衣芽孢杆菌并不局限于为说明本发明所述的地衣芽孢杆菌，只要无毒性的地衣芽孢杆菌均是本发明所述，均在本发明的保护范围内。

本发明所述地衣芽孢杆菌优选但不限于地衣芽孢杆菌DHH21保藏编号CGMCC8563，地衣芽孢杆菌DHH09保藏编号CGMCC8567。

本发明实施说明中优选使用的地衣芽孢杆菌的细菌学性质，本发明并不局限本发明所述细菌学性质，只是为说明本发明的优选：

1、为说明本发明，本发明利用上述方法分离的地衣芽孢杆菌分别为地衣芽孢杆菌DHH21保藏编号CGMCC8563，地衣芽孢杆菌DHH09保藏编号CGMCC8567。

2、菌体或菌落形态

显微镜观察：菌体长1.5-3微米，宽0.6-0.8微米，革兰氏染色阳性，芽孢呈椭圆型或柱状，中生或偏中生。

平板形态：菌落不透明、白色、湿润有光泽。

3、生理生化鉴定

吲哚：-；明胶液化：+；硝酸盐还原：+；卵黄反应：-；V-P试验：+。

4、糖酵解实验鉴定

阿拉伯糖：+；葡萄糖：+；木糖：+；甘露糖：+。

本发明所述的地衣芽孢杆菌指活生物个体。