[发明专利]异色瓢虫特异性COI引物、含有该引物的试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 201410014579.7 | 申请日： | 2014-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN103773860A | 公开（公告）日： | 2014-05-07 |
| 发明（设计）人： | 杨帆;王倩;陆宴辉;徐建祥 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100193 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 瓢虫 特异性 coi 引物 含有 试剂盒 及其 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.异色瓢虫特异性COI引物，其特征在于，其包括：
正向引物HaF3：5'-AATTGTTACAGCTCATGCT-3’
反向引物HaR3：5’-CCCCTATTTCTACGATTG-3’。
2.含有权利要求1所述引物的用于检测异色瓢虫的试剂盒。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+、PCR反应缓冲液中的至少一种。
4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准阳性模板。
5.权利要求1所述引物或权利要求2-4任一项所述试剂盒在检测异色瓢虫中的应用。
6.异色瓢虫的特异性PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）提取样品DNA；
2）以步骤1）提取的DNA为模板，利用权利要求1所述的引物HaF3和HaR3进行PCR扩增反应；
3）分析PCR产物。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，PCR反应体系以20μL计为：
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于，PCR反应条件为：94℃4分钟；94℃30秒，54℃30秒，72℃30秒，共40个循环。
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