[发明专利]利用海蟹共生烟曲霉生产烟曲霉文丙的方法及其培养基

权利要求书

1.一种用于发酵培养海蟹共生烟曲霉生产烟曲霉文丙的培养基，其特征在于，每升所述培养基的成分包含有糖蜜50-150g/L、蔗糖40-80 g/L、硝酸钠2-5 g/L、磷酸氢二钾0.5-1.5 g/L、氯化钾0.25-1 g/L、七水硫酸镁0.25-1 g/L、硫酸亚铁0.005-0.02 g/L、，硫酸锌0.005-0.02 g/L、硫酸铜0.001-0.01 g/L、色氨酸 0.5-1.5 g/L，以自来水溶解。

2.根据权利要求1所述的一种用于发酵培养海蟹共生烟曲霉生产烟曲霉文丙的培养基，其特征在于，每升所述培养基的成分包含：所述糖蜜 90-130 g/L、蔗糖55-75 g/L、硝酸钠 3-4.5 g/L、磷酸氢二钾0.9-1.3 g/L、氯化钾 0.4-0.7 g/L、七水硫酸镁 0.4-0.7 g/L、硫酸亚铁 0.009-0.013 g/L、硫酸锌 0.009-0.013 g/L、硫酸铜 0.004-0.007 g/L、色氨酸 0.8-1.3 g/L，以自来水溶解。

3.一种用于发酵培养海蟹共生烟曲霉生产烟曲霉文丙的培养基之制备方法，其特征在于，将所述糖蜜、蔗糖、硝酸钠、磷酸氢二钾、氯化钾、七水硫酸镁、硫酸亚铁、硫酸锌、硫酸铜、色氨酸准确称量后，以自来水溶解，并定容至1000 ml，使上述成分在培养基中的终浓度分别为50-150g/L、40-80 g/L、2-5 g/L、0.5-1.5 g/L、0.25-1 g/L、0.25-1 g/L、0.005-0.02 g/L、， 0.005-0.02 g/L、0.001-0.01 g/L、0.5-1.5 g/L，再以盐酸调节pH值至4.0-4.5，然后在121℃下灭菌15-30 分钟。

4.一种利用海蟹共生烟曲霉生产烟曲霉文丙的方法，其特征在于，所述方法包括以下操作步骤：

a.将冷冻保存的海蟹共生烟曲霉解冻后，在固体平板培养基中央进行点样并活化培养4-6天，获得新鲜固体平板培养基，固体平板培养基每隔30天重新活化一次；

b.从新鲜的海蟹共生烟曲霉的固体平板培养基中挖取1块琼脂块，接种至种子培养基中发酵培养3-4天，获得新鲜种子液；

c.取所述新鲜种子液，按5-20% (v/v)的接种量接入权利要求1和2任一项所述培养基，以28±2°C、130±20 rpm摇床振荡培养3-5天后，将转速降为0 rpm，静置培养7-10天，获得发酵液；以及

d.取所述发酵液进行抽提、萃取、纯化，获得烟曲霉文丙。