[发明专利]利用微生物的D-手性肌醇的生产方法

说明书

本发明涉及利用表达酶肌醇转运体、肌醇脱氢酶及肌糖异构酶的转化的宿主细胞来从肌醇生产D‑手性肌醇的方法。根据本发明的方法，能够以高收率将肌醇转换为D‑手性肌醇。

技术领域

本发明涉及利用微生物的D-手性肌醇的生产方法。更详细地，涉及基于转化的微生物宿主细胞从肌醇生产D-手性肌醇的方法。

背景技术

D-手性肌醇(D-chiro-inositol，cis-l,2,4-trans-3,5,6-cyclohexol)作为肌醇(myo-inositol，cis-l,2,3,5-trans-4,6-cyclohexanehexol)的立体异构体，是3号羟基被差向异构化的形态(图1)。据报告，D-手性肌醇为肌醇磷酸聚糖(IPG)的主要组成成分，是胰岛素信号传输的重要介质，众所周知，上述D-手性肌醇对二型糖尿病具有治疗效果。D-手性肌醇主要在真核生物中被发现，借助肌醇的差向异构化来实现生物合成。

D-手性肌醇主要通过D-松醇(D-pinitol)或春雷霉素(kasugamycin)的盐酸水解来生产(U.S.Pat No.5827896,U.S.Pat No.5091596,U.S.Pat No.5463142,U.S.PatNo.5714643)。但是，虽然作为原料的D-松醇或春雷霉素的价格高昂，并且，众所周知的还有有机合成法(U.S.Pat No.5406005,W096/25381)，由于难以分离副产物，因而经济性差。

山本(Yamamoto)等提出了利用表达农杆菌AB10121(Agrobacterium sp.AB10121)的MI差向异构酶(epimerase)的细菌来从肌醇转换为手性肌醇的方法(JP2001-006878、WO2002/055715)。山本等提出的方法能够以约15％的收率从肌醇生产D-手性肌醇。

本说明书全文中，参照了多篇论文及专利文献，并表示了其引用。所引用的论文及专利文献的公开内容全部插入于本说明书作为参照，从而更加明确说明本发明所属的技术领域的水平及本发明的内容。

发明内容

本发明要解决的技术问题

本发明人为了利用微生物来从肌醇生产手性肌醇而努力研究，其结果，确认如下情况来完成了本发明，即，若利用由包含肌醇转运体(myo-inositol transporter)、肌醇脱氢酶(inositol dehydrogenase)及肌醇异构酶(inositol isomerase)编码基因的重组表达载体转化的宿主细胞，则能够以高收率从肌醇生产D-手性肌醇。

因此，本发明的目的在于，提供利用转化的宿主细胞来从肌醇生产D-手性肌醇的方法。

本发明的再一目的在于，提供表达肌醇转运体、肌醇脱氢酶及肌糖异构酶的转化的宿主细胞。

本发明的另一目的在于，提供用于生产包含上述转化的宿主细胞的D-手性肌醇的组合物。

本发明的还一目的在于，提供包含具有将肌醇转运体、肌醇脱氢酶及肌糖异构酶编码的脱氧核糖核酸(DNA)序列的重组载体的、生产D-手性肌醇的试剂盒。

以下发明的详细说明、发明要求保护范围及附图，将更加明确本发明的目的及优点。

技术方案