[发明专利]利用微生物的D-手性肌醇的生产方法有效
申请号: | 201380061680.1 | 申请日: | 2013-09-26 |
公开(公告)号: | CN105229152B | 公开(公告)日: | 2019-02-26 |
发明(设计)人: | 明贤君;尹相活;李炫抒 | 申请(专利权)人: | (株)韩国迪外天然健康 |
主分类号: | C12N15/52 | 分类号: | C12N15/52;C12N15/63;C12N1/21;C12P7/18 |
代理公司: | 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所 11038 | 代理人: | 郑天松 |
地址: | 韩国大*** | 国省代码: | 韩国;KR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 利用 微生物 手性 生产 方法 | ||
1.一种从肌醇生产D-手性肌醇的方法,其包括:
步骤(a),使用如下载体来转化大肠杆菌(E.coli)细胞:
(i)包含操作性地与启动子相结合的肌醇转运体编码DNA序列的重组载体、以及
(ii)包含操作性地与启动子相结合的肌醇脱氢酶编码DNA序列及肌糖异构酶编码DNA序列的重组载体,
从而得到转化的大肠杆菌(E.coli)细胞;以及
步骤(b),在包含肌醇的培养基中培养所述转化的大肠杆菌(E.coli)细胞,
其中所述肌醇转运体由下列序列组成:
在SEQ ID NO:3中公开的氨基酸序列、或者
在SEQ ID NO:3和4中公开的氨基酸序列,
其中所述肌醇脱氢酶由在SEQ ID NO:31中公开的氨基酸序列组成,且
其中所述肌糖异构酶由在SEQ ID NO:30中公开的氨基酸序列组成。
2.根据权利要求1所述的方法,其中在所述步骤(b)之后,还包括从培养了所述转化的大肠杆菌(E.coli)细胞的培养物分离D-手性肌醇的步骤(c)。
3.一种大肠杆菌(E.coli)细胞,其使用如下载体来转化所述大肠杆菌(E.coli)细胞:
(i)包含操作性地与启动子相结合的肌醇转运体编码DNA序列的重组载体、以及
(ii)包含操作性地与启动子相结合的肌醇脱氢酶编码DNA序列及肌糖异构酶编码DNA序列的重组载体,
其中所述肌醇转运体由下列序列组成:
在SEQ ID NO:3中公开的氨基酸序列、或者
在SEQ ID NO:3和4中公开的氨基酸序列,
其中所述肌醇脱氢酶由在SEQ ID NO:31中公开的氨基酸序列组成,且
其中所述肌糖异构酶由在SEQ ID NO:30中公开的氨基酸序列组成。
4.一种用于从肌醇生产D-手性肌醇的用途的组合物,其中所述用于从肌醇生产D-手性肌醇的用途的组合物包含所述权利要求3所述的大肠杆菌(E.coli)细胞。
5.一种用于从肌醇生产D-手性肌醇的重组载体试剂盒,其包含如下重组载体作为有效成分:
(i)包含操作性地与启动子相结合的肌醇转运体编码DNA序列的重组载体、以及
(ii)包含操作性地与启动子相结合的肌醇脱氢酶编码DNA序列及肌糖异构酶编码DNA序列的重组载体,
其中所述肌醇转运体由下列序列组成:
在SEQ ID NO:3中公开的氨基酸序列、或者
在SEQ ID NO:3和4中公开的氨基酸序列,
其中所述肌醇脱氢酶由在SEQ ID NO:31中公开的氨基酸序列组成,且
其中所述肌糖异构酶由在SEQ ID NO:30中公开的氨基酸序列组成。
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