[发明专利]pH敏感性载体及其制造方法、以及含有该载体的pH敏感性药物、pH敏感性药物组合物及使用其的培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及pH敏感性载体及其制造方法、以及含有该载体的pH敏感性药物、pH敏感性药物组合物及使用其的培养方法。更详细而言，本发明涉及作为DDS(药物递送系统，Drug Delivery System)有用的、应答于弱酸性环境而表现膜破坏功能促进效果的pH敏感性载体及其制造方法、以及含有该载体的pH敏感性药物、pH敏感性药物组合物及使用其的培养方法。

背景技术

近年来，用于将生理活性物质以必需量送达到必需部位的DDS介载体(载体)的研究盛行。从积聚性的提高、对送达部位的选择的观点出发，刺激应答性介载体备受瞩目，报道了大量利用热或磁力等外部刺激、分子识别、pH变化、酶反应等生物体内的刺激的研究等。其中，对弱酸性的pH具有敏感性的介载体长期以来备受瞩目。

例如，作为应答于弱酸性环境的pH敏感性载体，在含有PE(磷脂酰乙醇胺，Phosphatidylethanolamine)的脂质体中加入PHC(棕榈酰同型半胱氨酸，Palmitoyl Homocyseine)、油酸、CHEMS(胆固醇琥珀酸单酯，Cholesteryl Hemisuccinate)等各种pH敏感性材料而得到的pH敏感性脂质体(S.Simoes et al.Adv.Drug Deli.Rev.2004 56 947-965等)是广为人知的。最近，为了提高功能，报道了PEAA(聚(2-乙基丙烯酸)，Poly(2-ethylacrylic Acid))、SucPG(Succinylated Poly(glycidol))等新型合成材料，GALA、pHLIP(pH Low Insertion Peptide)等合成肽，PLGA(Poly(Lactic-co-glycolic Acid))等生物降解性的材料，使用了pH敏感性的病毒成分的VLP(病毒样颗粒，Virus Like Particle)、病毒颗粒(Virosome)等的研究。

另外，对于pH敏感性的介载体，也期待生理活性物质被高效地送达至肿瘤、炎症等生物体内pH下降的部位(Reshetnyak et al.PNAC2007vol，104，19，7893-7898)，或者利用被细胞摄取后的小泡的酸性化而向细胞质基质送达等。

作为利用小泡的酸性化而向细胞质基质的送达，发现通过在被送达至核内体时介载体的膜融合被促进，这可促进药物向细胞质基质的迁移，已报道了具有应答于pH而改变结构的pH敏感性部位、膜融合的部位和膜贯通部位的肽衍生物的DDS介载体(日本特开2006-34211号公报)。

如上所述的生理活性物质向细胞质基质的送达可应用于各种领域，因此是极其希望实现的技术。例如，向RNA或DNA的细胞质基质的送达能够进行基因治疗，期待通过将抗原送达细胞质基质从而诱导CTL(细胞毒性T淋巴细胞，Cytotoxic T Lymphocyte)。另外，有报道称低分子抗癌剂的细胞质基质送达具有提高活性的效果，也研究了对于将细胞内作为药物靶标的新型药剂的应用。生理活性物质向细胞质基质的送达是这些领域的主要课题，是实现上述目标的关键性技术。

而且，因为利用在pH6以下具有敏感性的pHLIP的向酸中毒(acidosis)部位送达已有成功事例(Reshetnyak et al.PNAC 2007vol，104，19，7893-7898)，以及因为核内体内的到达pH为4左右(S.Simoes et al.Adv.Drug Deli.Rev.2004 56 947-965)，因此要求pH敏感性的载体在从中性至pH4之间具有高敏感性。关于这一点正如在很多文献中已被指出。此外，考虑到实用的情况，由安全的材料形成也很重要。

发明内容

许多pH敏感性脂质体和一部分生物降解性材料等存在下述问题：在比较低的pH条件下具有敏感性、仅具有不充分的功能。另外，直接修饰pH敏感性物质的方法有可能降低生理活性物质的活性。此外，从安全性的观点考虑，使用新型的合成材料、使用病毒成分尚存悬念。

因此，本发明鉴于上述情况而完成，目的在于提供能够成为生理活性物质的介载体的、应答于弱酸性环境而表现膜破坏功能促进效果的pH敏感性载体及其制造方法、以及含有该载体的pH敏感性药物、pH敏感性药物组合物及使用其的培养方法。