[发明专利]用于扩增核酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于扩增核酸的方法。

背景技术

用于扩增核酸的方法是本领域已知的。专利说明书US 4 683 202公开了一种用于扩增在核酸或核酸混合物中含有的特定核酸序列的方法，其中每个核酸由2个具有相等或不等长度的单独互补链组成。所述方法包括：(a)在特定条件下用针对每种要扩增的不同特定序列的2种寡核苷酸引物处理所述链，所述条件使得，对于每种要扩增的不同序列，合成与每种核酸链互补的每种引物的延伸产物，其中选择所述引物以致于与每种特定序列的不同链充分互补，使得从一种引物合成的延伸产物当与它的补体分离时可以充当用于合成其它引物的延伸产物的模板；(b)将引物延伸产物与用于合成它们的模板分离，以产生单链分子；和(c)在使用在步骤(b)中产生的每个单链作为模板合成引物延伸产物的条件下，用步骤(a)的引物处理从步骤(b)制备的单链分子。所述步骤可以连贯地或同时地进行。此外，可以重复步骤(b)和(c)，直到已经达到期望的序列扩增程度。就其中使用聚合酶执行步骤(a)和(c)的方法而言，所述方法通常被称作聚合酶链式反应(PCR)。

国际专利申请WO 2007/143034 A1公开了据推测适合用于执行PCR的方法。所述方法可以包括在PCR中使用光源来提供加热。所述方法还可以包括使用表面等离子体共振或荧光共振能量转移来实现PCR反应的实时监测。所述方法可以包括：将模板、引物或聚合酶固定化在表面(诸如金)上或在另一种表面等离子体共振活性表面上。

专利申请US 2002/0061588 A1公开了提供对外部信号局部地和直接地做出应答的核酸的方法。所述信号排它地作用于核酸的一个或几个特定的局部化部分上。根据该发明，所述信号可以改变特定核酸的性能，并由此改变它的功能。因而，该发明提供了这样的方法：其控制生物样品中的核酸的结构和功能，而不影响样品的其它部分。在一个实施方案中，调节剂将热传递至核酸或核酸的组成部分，这导致例如分子间或分子内键的去稳定化以及核酸的结构和稳定性的改变。优选的调节剂包括金属纳米颗粒、半导体纳米颗粒、磁性纳米颗粒、氧化物纳米颗粒和生色团。还有人提出，与PCR结合使用这些方法。具体地，有人提出，用调节剂控制PCR反应。

专利申请US 2003/0143604 A1涉及使用纳米颗粒检测探针来监测扩增反应，尤其是PCR。具体地，该专利申请涉及使用保护剂(诸如牛血清白蛋白)处理过的纳米颗粒寡核苷酸缀合物来定量地和定性地检测靶多核苷酸。该专利申请公开了使用金纳米颗粒引物的核酸扩增和检测。在第一步中，在有用引物官能化的金纳米颗粒存在下，使核酸靶标变性。在第二步中，使金纳米颗粒及其连接的寡核苷酸与核酸靶标杂交，并从连接至纳米颗粒的核酸引物开始产生互补DNA序列的一个拷贝。重复第一步和第二步，并检测通过扩增的互补纳米颗粒探针的结合而产生的光信号。

根据本发明的问题

本发明的根本问题是，提供一种改进的用于扩增核酸的方法。

根据本发明的解决方案

通过具有权利要求1的特征的方法解决了所述问题。所述方法用于扩增核酸，其中在反应体积中，纳米颗粒通过激发将热传递至它们的环境。

所述反应体积是在其中执行根据本发明的方法的体积。所述体积可以被反应容器包围。所述反应体积含有样品。所述样品含有液体，优选水。在所述样品中可以含有通过所述方法可扩增的核酸。