[发明专利]一种化妆品微生物的检测方法

说明书

发明领域

本发明涉及化妆品微生物检验技术领域，具体的说，本发明涉及一种化妆品中细菌的检验技术领域。

背景技术

随着生活水平的不断提高，化妆品已经成为人们日常生活中不可或缺的必需品。化妆品的种类与数量与日俱增，同时其卫生质量倍受管理部门和消费者的重视，而化妆品微生物学指标(菌落总数、霉菌和酵母菌、粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌) 是日常化妆品检测的必检指标(除少数含有75%乙醇和染发产品以外)。

    化妆品是人们的日常用品，化妆品因原料中存在油脂、蛋白质、淀粉、维生素、水分等众多营养性成分，为微生物的滋生和繁殖提供了良好的营养环境。微生物会将化妆品中的营养成分代谢分解，致使化妆品腐败变质，不仅使化妆品的色、香、味及剂型发生变化，而且可能对使用者的健康造成严重危害。因此，化妆品中一些有害微生物的分离与检测是当前化妆品卫生质量控制的重要问题。随着我国经济的快速发展，人民的生活水平不断提高，对化妆品的需求量也越来越大。人们在使用化妆品的同时，对化妆品卫生指标也越来越重视。由于一些工厂对化妆品生产过程中的微生物标准控制得不好，造成上市的部分化妆品细菌含量严重超标，甚至检出了致病菌。这种消息常见诸报端，引起了消费者的恐慌。如何控制好微生物指标，确保生产出卫生指标合格的产品，更好地为广大消费者服务，是摆在化妆品制造厂商面前一个急需解决的重要课题。

 

发明内容

为了使化妆品微生物检测进一步简单快捷，本发明针对目前《化妆品卫生规范》方法中对应的检测方法，对微生物的检测方法进行了如下的改良简单方便，更利于实际应用。

    本发明提供了对化妆品中微生物的检验方法进行了改进。

本发明的技术方案：针对目前《化妆品卫生规范》方法中对应的检测方法，结合日常检测，我们发现，粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌在卵磷脂吐温80营养琼脂培养基上菌落形态比较典型，同时也比较好辨认，为了使化妆品微生物检测进一步简单快捷，本发明用SCDLP增菌液代替生理盐水直接稀释样品，用SCDLP增菌液代替乳糖胆盐对粪大肠菌群增菌，将SCDLP增菌液增菌后的样品，转种在卵磷脂吐温80营养琼脂培养基上分离，直接在此培养基中挑取可疑的粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌菌落进行革兰氏染色和进一步的生化鉴定，省略伊红美兰、乙酰胺和BP三种培养基对粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌三种致病菌的分离。

卵磷脂吐温80营养琼脂不含有抑制细菌生长的物质，是广谱培养基，因此，粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌，在卵磷脂吐温80营养琼脂上均应生长良好。本文尝试SCDLP增菌后用卵磷脂吐温80营养琼脂平板对三种致病菌进行分离，试验表明三种菌在卵磷脂吐温80营养琼脂平板上均生长良好，并伴有典型菌落特征。

有益效果：本发明化妆品中微生物的检验方法与现有技术相比，用增菌液代替生理盐水以及糖胆盐对粪大肠菌群增菌，将增菌后的样品，转种在卵磷脂吐温80营养琼脂培养基上分离，直接在此培养基中挑取可疑的菌群、菌落进行革兰氏染色和进一步的生化鉴定，省略了对粪大肠菌群、铜绿假单胞菌和金黄色葡萄球菌三种致病菌的分离。改进后的检验法简单明了，可操作性强，大大降低了分析成本，方法简单，无复杂步骤，易于推广应用，可以用于化妆品的日常快速检测。

下面，结合实施例对本发明化妆品中微生物的检验方法的技术特征作进一步的说明。

1 备检液制备

样品1:10备检液 无菌操作称取亲水性样品称10g(ml)±0.1g(ml)加到90ml SCDLP增菌液的玻璃瓶中;疏水性样品称10g(ml)±0.1g(ml)加5ml经灭菌的吐温80，加到75ml SCDLP增菌液的玻璃瓶中，经充分混匀制成1:10的样品制备液。

样品1:100备检液 吸取以上样品备检液10ml，加到90ml SCDLP增菌液的稀释瓶中，制成1:100的样品备检液。

阳性对照 浓度为10²的大肠埃希菌标准菌株AMMS8099和白色念珠菌ATCC10231作为菌落总数和霉菌和酵母菌阳性对照。大肠埃希菌AMMS8099、金黄色葡萄球菌NICPBP26112、铜氯假单胞菌NICPBP10211标准菌株，菌液浓度为10¹混合液10ml加入90ml SCDLP增菌液中作为致病菌的阳性对照。

2 菌落总数检测