[发明专利]利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法

权利要求书

1.一种利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，将具备一定功能的多肽连接在DNA纳米结构上，所制备的产物为DNA纳米结构与多肽的复合物，DNA纳米结构表面负载生物分子后与细胞相互作用时，特定功能的多肽能介导负载生物分子的DNA纳米结构进入细胞或特异性地与细胞表面的受体结合，实现DNA结构用作抗肿瘤药物载体的目的；

其中所述的DNA纳米结构，由DNA通过自组装、延伸、折叠等技术构成的一类纳米结构，组成此结构的单链DNA，可经过如巯基、生物素、或氨基等修饰。

2.根据权利要求1所述利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，多肽介导的DNA纳米结构的制备包括以下几个步骤：

（1）长链DNA溶液中中，加入订书钉链DNA，高温下混合均匀后缓慢降至室温；

（2）向（1）步骤所得产物中，加入生物分子，混合均匀后水浴中连接；

（3）向（2）步骤所得产物中，加入多肽溶液，混合均匀后水浴中连接；

（4）将（3）步骤所得的产物加入到到细胞培养皿中，37℃，5.0%二氧化碳的细胞培养箱中与细胞共培养；

（5）细胞用缓冲液洗涤后，将细胞用多聚甲醛或甲醛固定；

（6）细胞用缓冲液洗涤后，用荧光染料将细胞核染色；

（7）激光共聚焦荧光显微镜观察内部具有量子点荧光的细胞。

3.根据权利要求2所述利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，步骤（1）所述长链DNA为合成的长链DNA、噬菌体M13、经过滚环扩增技术所得的长单链DNA中的一种；所述订书钉链DNA，为多条能与长链DNA互补杂交的单链DNA，可经过巯基、氨基、生物素修饰。

4.根据权利要求2所述利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，步骤（1）所述高温为95℃，室温25℃，降温时间为12小时以上。

5.根据权利要求2所述利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，步骤（2）所述生物分子为亲和素、链霉亲和素、量子点、荧光分子、纳米粒子、DNA、RNA、多肽、小分子药物中的一种；其中量子点发射波长为560、580、600、620、640nm。

6.根据权利要求2所述利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，步骤（2）所述生物分子连接条件为37℃水浴，30分钟以上。

7.根据权利要求2所述利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，步骤（3）所述多肽是由氨基酸构成的功能性蛋白质，具体为穿膜肽、与细胞表面受体结合的功能性多肽。

8.根据权利要求2所述利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，步骤（3）所述与多肽连接条件为室温30分钟以上。

9.根据权利要求2所述利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，步骤（3）所述多肽通过静电吸附作用方式连接在DNA纳米结构上。

10.根据权利要求2所述利用多肽介导的DNA纳米结构用作抗肿瘤药物载体的方法，其特征在于，步骤（4）所述细胞为肿瘤细胞、吞噬模型细胞或表面有表达受体可与所用多肽相作用的细胞 。