[发明专利]一种促进猪血水解的方法

说明书

技术领域

水解猪血制备多肽的方法有酸法、碱法、酶法及其混合法。本发明进一步用超声波作用，促进了猪血的水解，使其得到更好的利用于食品、化妆品、医药和保健品等领域。

背景技术

目前在欧美、日本等发达国家猪血的利用率已达50％以上，他们主要是开发肽类试剂、肽类药物以及功能食品和食品添加剂，而我国猪血的利用率不超过10％并且利用猪血资源开发的产品还比较单调，除了小部分被加工成血粉或发酵血粉作为饲料添加剂，以及用于生化制药生产血红素、超氧化物歧化酶、蛋白胨外相当大的一部分都作为废弃物排出，既浪费了宝贵的蛋白质资源，又严重污染了周围的环境。我国开发的血液制品种类很少，畜血在食品上的应用近于空白。

猪血是一种高蛋白、低脂肪、低糖，而微量元素含量丰富的食品工业副产品，其蛋白质含量为18％左右，]与猪瘦肉相当，故有“液态肉”之称。降解猪血可产生一些具有特殊生理功能的生物活性肽，这些生物活性肽在调节胃肠道运动、调节免疫系统、抗高血压、抗血栓、抗菌、抗病毒、抗癌、清除自由基和促进矿物元素吸收等方面发挥重要作用。近年来，对肽在蛋白质营养中的作用越来越受到重视，小肽能被完整吸收的观点也被广大学者所接受。

将猪血蛋白变性并部分水解为氨基酸和小肽可有效提高其利用率，蛋白质是人体所需的重要营养素之一，它在人体内以氨基酸或肽的形式被消化吸收。近年来的研究发现，非单一氨基酸形式的小肽类(27个氨基酸)在人体的吸收代谢方面具有重要的生理功能，它在体内的消化吸收优于单一的氨基酸。许多国家近年来开发出多种用于病人和特殊生理需要人群的肽类保健与功能食品。

水解猪血制备多肽的方法有很多，如：酸法、碱法、酶法及其混合法。采用的蛋白酶多为碱性蛋白酶中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、风味蛋白酶及胃蛋白酶等。多数采用AS1.398中性蛋白酶单一或者混合其它的酶进行酶解的复合酶法。

发明内容

水解猪血制备多肽的方法有酸法、碱法、酶法及其混合法。本发明进一步用超声波作用，促进了猪血的水解。

具体实施方式

实施例一

对照组：酶-碱水解法

1取100ml血浆调节pH7.6-pH7.8，加入8000u／g的胰酶(加酶量以蛋白质含量计)，55℃水解5h。

2向上述水解液中加入8％的NaOH溶液，80℃水解3h。

3水解完成后，用6N盐酸中和，过滤，喷雾干燥，测定产品水解度以判断水解程度。

超声波组：酶解过程中，同时用超声波发生器施加20kHz超声波，其它操作同对照组完全一样。

结果：对照组水解度为55.2％，而超声波组为76.1％，超声波组取得了更好的提取效果。

实施例二

对照组：蛋白酶法

新鲜猪血从屠宰场收集后，按8g／L血液的用量迅速加入柠檬酸钠抗凝，然后用干净纱布过滤除纤，再在4000r／min转速离心20min，弃上清液，加蒸馏水调血红蛋白浓度为8％，在一定条件下加酶水解，中性蛋白酶酶浓度6000U／g，水解8h，并用4mol／L氢氧化钠维持其pH值恒定。水解完毕后，在沸水中灭酶10min，经离心后加入活性炭进行脱色处理，离心可得水解蛋白液。

超声波组：酶解过程中，同时用超声波发生器施加20kHz超声波，水解时间缩短为4h。

结果：对照组水解度为12.7％，而超声波组为19.1％，超声波组取得了更好的提取效果，且缩短了水解时间。

实施例三

对照组：猪血从屠宰场收集后，纱布过滤除去杂质，迅速添加0.6％柠檬酸三钠抗凝，另取少量血液测定蛋白质含量，抗凝血充分搅打10min后，加1.2～1.5倍蒸馏水稀释，通过不断地搅打和在低渗情况下使红细胞破胞溶血，直接煮沸或加变性剂处理后，纯水配制蛋白质浓度7％～8％的溶血液，加入复合蛋白酶(中性蛋白酶和木瓜蛋白酶)水解，加酶量6000u／m1，温度为40℃，通过滴加，4mol／L氢氧化钠来维持其pH值恒定在7.5，水解时间为10h。最后用6mol／L HCl调pH至4.0，使酶失活，终止反应，测定氨基酸态氮并计算蛋白水解率。

超声波组：酶解过程中，同时用超声波发生器施加20kHz超声波，水解时间缩短为5h。

结果：对照组水解度为15.8％，而超声波组为25.3％，超声波组取得了更好的提取效果，且缩短了水解时间。