[发明专利]一种抑制癌细胞生长的短肽及其编码基因

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种抑制癌细胞生长的短肽及其编码基因与应用。

背景技术

癌症是一种由于细胞增殖与凋亡的调控机制失常所引起的疾病。癌细胞生长失控，消耗人体过多营养，挤压正常器官，妨碍正常器官作用，还会局部侵入周遭正常组织甚至经由体内循环系统扩散或转移到身体其他器官，引起器官功能衰竭。癌症已经成为全球人类健康的首要杀手之一，近年来我国癌症发病更是逐渐趋于低龄化。发现并发展新的癌症治疗的药物，对于社会的稳定，人民健康生活质量的提高，社会经济发展都具有良好的推动作用。

目前对于癌症的治疗主要有以下几种：手术治疗，对于良性肿瘤疗效较好，但是对于没有包膜包裹的癌症组织和扩散性肿瘤难以完全根除；放射性治疗，是利用某些肿瘤对射线敏感的特点选择性地杀死癌细胞，但是对于不敏感型以及易扩散型癌细胞疗效较差，而且在治疗过程中也会造成正常细胞的死亡；化学治疗，是将对细胞有毒、有害的药物经由循环系统带到全身，虽然对于扩散型癌细胞也有一定疗效，但是这种治疗方法对于全身的正常细胞也会造成极大伤害，使癌症病人在治疗癌症过程中承受巨大的生理和心理的折磨。因此开发出一种疗效好、应用范围广、副作用小的抗癌药物是癌症患者和医学工作者的共同心愿。

癌症细胞的调控机制失常往往是由于一些重要调控基因的失活造成的。目前，已经发现的抑癌基因根据其在细胞中的失活机理可简单的分为两类。I型抑癌基因是指其在DNA层面上，基因发生突变而丧失抑制细胞生长作用的基因。II型抑癌基因是一种新颖的抑癌基因，它们在正常细胞中存在一定水平的表达，具有一定的功能，在肿瘤细胞中其基因的转录和翻译在不同程度上下调，从而丧失抑制细胞生长的作用，但其DNA并没有发生改变。正因如此，II型抑癌基因对于正常细胞没有生长抑制或诱导凋亡的作用，而对于大多数癌症细胞则具有很明显的抑制和诱导细胞凋亡的作用。因此，II型抑癌基因中具有抑癌作用的短肽将有望成为新型的抗癌新药。

由人类基因组片段翻译得到的短肽在细胞中能够被多种酶降解代谢为天然氨基酸，对人体没有毒性，也不会造成累计效应。由于II型抑癌基因的自身特点，对正常细胞不产生抑制作用，来自II型抑癌基因的短肽将不会对正常细胞或人体正常器官组织产生副作用，减少治疗过程对癌症病人造成的痛苦。因此，来自II型抑癌基因的抑癌短肽有望成为一种新型的绿色仿生药物。

发明内容

本发明的一个目的是提供一种具有抑癌作用的多肽。

本发明提供的多肽，是如下（a）或（b）的多肽：

（a）由序列表中SEQ ID No：2所示的氨基酸序列组成的多肽；

（b）将序列表中SEQ ID No：2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加，且具有抑制肿瘤细胞生长和/或促进肿瘤细胞凋亡功能的由（a）衍生的多肽。

所述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加为不超过10个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

本发明还提供了上述多肽的编码基因。

所述多肽的编码基因为如下1）～3）中任一所述的DNA分子：

1）序列表中的SEQ ID No：1所示的DNA分子；

2）在严格条件下能与1）限定的DNA序列杂交且编码具有抑制肿瘤细胞生长和/或促进肿瘤细胞凋亡功能的多肽的DNA分子；

3）与1）限定的DNA序列具有70%以上的同源性且编码具有抑制肿瘤细胞生长和/或促进肿瘤细胞凋亡功能的多肽的DNA分子。

含有所述基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌也在本发明保护的范围内。

在本发明的一个具体实例中，所述重组载体为将所述多肽的编码基因插入BFP-linker-pcDNA3.1中，得到表达所述多肽的重组载体。

所述BFP-linker-pcDNA3.1按照如下方法制备：

1）在pcDNA3.1载体的NotI和ClaI酶切位点间插入Tag BFP编码基因（SEQ ID No：3），得到重组载体BFP-pcDNA3.1；

2）在步骤1）得到的重组载体BFP-pcDNA3.1的ClaI和BspEI酶切位点间插入Linker基因的DNA片段（SEQ ID No：6），得到载体BFP-linker-pcDNA3.1。

所述转基因细胞系是将所述的重组载体导入到宿主细胞中得到的转基因细胞系，所述宿主细胞具体可以为子宫颈癌细胞，所述子宫颈癌细胞尤其优选为HeLa细胞。