[发明专利]冠状病毒NL63实时荧光PCR检测试剂盒及其非诊断性检测方法有效
| 申请号： | 201310578897.1 | 申请日： | 2013-11-18 |
| 公开（公告）号： | CN103710461A | 公开（公告）日： | 2014-04-09 |
| 发明（设计）人： | 朱玉兰;刘胜牙;谢聪贤;甄胜西;徐媛 | 申请（专利权）人： | 深圳国际旅行卫生保健中心 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京中创阳光知识产权代理有限责任公司 11003 | 代理人： | 尹振启 |
| 地址： | 518033 广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 冠状病毒 nl63 实时 荧光 pcr 检测 试剂盒 及其 诊断 方法 | ||
1.冠状病毒NL63实时荧光PCR非诊断性检测方法，其特征在于，其设计的引物和探针为：
2.如权利要求1所述冠状病毒NL63实时荧光PCR非诊断性检测方法，其特征在于，所述非诊断性检测方法的具体步骤为：
1）设计所述引物和探针；
2）提取病毒RNA；
3）实时荧光PCR扩增及分析：通过调整反应体系中探针和引物的反应浓度，选择最佳反应体系。
3.如权利要求1所述冠状病毒NL63实时荧光PCR非诊断性检测方法，其特征在于，所述反应体系为：2X One Step RT-PCR Buffer312.5μl，TaKaRa Ex Taq HS0.5μl，PrmieScrip RT Enzyme Mix20.5μl，Primer10.2μl，Primer20.2μl，Probe1μl，ROX Dye II0.5μl，Rnase Free dH2O4.6μl。
4.如权利要求1所述冠状病毒NL63实时荧光PCR非诊断性检测方法，其特征在于，所述反应体系的反应条件为：42℃8min；95℃10s；95℃5s，58℃34s，45Cycles。
5.如权利要求1所述冠状病毒NL63实时荧光PCR非诊断性检测方法，其特征在于，所述非诊断性检测方法对冠状病毒NL63的最低检测量为7.49×101copies/ml。
6.冠状病毒NL63实时荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒中采用的引物和探针为：
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