[发明专利]基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片

权利要求书

1.基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片，其特征在于，包括如下3个mRNA上肾脏纤维化相关基因对应的引物：ACE、CD71、CCL5。

2.根据权利要求1所述的基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片，其特征在于：所述的3个肾脏纤维化相关基因对应的引物是：

ACE：SEQ ID NO.1-2；CD71 ：SEQ ID NO. 3-4；RANTES ：SEQ ID NO. 5-6。

3.根据权利要求1所述的基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片，其特征在于：所述的芯片是以PCR孔板作为载体，每个基因所对应的一个正向引物和一个反向引物加在一个孔中。

4.根据权利要求1所述的基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片，其特征在于：还包括有3个内参基因所对应的引物，所述的内参基因是B2M、ACTB、GAPDH。

5.根据权利要求1所述的基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片，其特征在于，各内参基因所对应的引物是：B2M ：SEQ ID NO.7-8、ACTB：SEQ ID NO.9-10、GAPDH：SEQ ID NO.11-12。

6.根据权利要求1所述的基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片，其特征在于：还包括有基因组DNA对照。

7.根据权利要求1所述的基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片，其特征在于：还包括有阴性对照和阳性对照。

8.根据权利要求3所述的基于实时荧光PCR的尿沉渣细胞肾脏纤维化检测芯片，其特征在于：每孔中的反应体系配置是：qPCR Master Mix 10μl ，cDNA 1μl，ddH₂O 补足至20 μl，所述的qPCR Master Mix中包括有 DNA聚合酶、dNTPs、Mg²⁺、荧光染料、正向引物和反向引物；其中正反向引物总量分别是2.5μM，体积为2μl。