[发明专利]一种石斛生物碱类成分的高效液相色谱指纹图谱构建方法及应用

权利要求书

1.一种石斛生物碱类成分的高效液相色谱指纹图谱构建方法，其特征在于，所述方法包括：

（1）材料收集

收集不同石斛品种，并培养组培苗

（2）标准石斛样品溶液的制备：取步骤1）的各石斛组培苗在105℃的烘箱中杀青15～20min，60℃烘箱中恒温烘干，粉碎，过60目筛，得样品粗粉，取样品粗粉0.5g，加入5ml氨水，润洗密塞30min，加入氯仿50ml称重，水浴65℃回流3h，冷却后，氯仿补足失重，得提取液；所述提取液旋转蒸发至干，加甲醇5ml溶解，用0.22μm微孔滤膜过滤，所得滤液作为标准石斛样品溶液；

（2）色谱条件：色谱柱为C18反相色谱柱；流动相：乙腈和水梯度洗脱；体积流量：1ml/min；柱温：30℃；检测波长：220nm；进样量：5-10ul；分析时间：62min；

梯度洗脱程序如下

时间（min）乙腈（%）水（%）02080508020522080622080

所述流动相中加有终浓度0.005%氨水；

（3）石斛生物碱类成分指纹图谱的获得，将步骤1）所述的标准石斛样品溶液注入高效液相色谱分析仪中，按步骤2）所述的色谱条件进行测定，获得对应样品的标准指纹图谱。

2.权利要求1所述指纹图谱构建方法的应用，其特征在于：按权利要求1的方法构建待测石斛生物碱类成分的高效液相色谱指纹图谱，将所述指纹图谱与权利要求1中所获得的对应样品的标准指纹图谱进行对比，比较待测石斛与标准石斛样品的中的生物碱成分，从而快速鉴别待测石斛的品种及石斛生物碱成分的质量。