[发明专利]水飞蓟黄酮木脂素的去甲基衍生物及其制备方法和其用途

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种水飞蓟黄酮木脂素的衍生物及其制备方法和其用途。 

背景技术

水飞蓟(Silybi Fructus)为菊科植物水飞蓟Silybum marianum(L.)Gaertn.(Milk thistle)的干燥成熟果实，原产于南欧、北非，收载于《中华人民共和国药典》(2010版)，性凉，味苦，归肝、胆经，具有清热解毒、疏肝利胆的功效，临床上用于肝胆湿热，胁痛，黄疸等肝胆疾病。水飞蓟主要包括6个黄酮木脂素类化合物的同分异构体，分别为水飞蓟宾A/B(silybin A/B，两个非对映异构体)、异水飞蓟宾A/B(isosilybin A/B，两个非对映异构体)、水飞蓟亭(silychristin)和水飞蓟宁(silydianin)。这类黄酮木脂素化合物已被开发成中成药水飞蓟素(又名益肝灵、利肝泰、西利马灵、利肝隆，CAS NO.65666-07-1)，临床上用于急、慢性肝炎，早期肝硬化，中毒性肝损伤等疾病的治疗；水飞蓟黄酮类成分也是保肝宁、飞当片等保肝利胆药的重要原料；在美国及欧洲将其有效成分水飞蓟宾作为抗氧化食品添加剂。 

发明内容

本发明的目的是提供一种水飞蓟黄酮木脂素的衍生物及其制备方法和其用途。 

本发明提供的一种水飞蓟黄酮木脂素是如式Ⅰ或式Ⅱ所示的化合物： 

本发明的还一个目的是提供式Ⅰ、式Ⅱ、式Ⅲ所示化合物或式Ⅳ所示化合物的制备方法， 

包括下述步骤1)和2)： 

1)将含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物加入培养基基础中；所述培养基基础为 适合菌株Eubacterium limosum ZL-II CGMCC NO.6846生长或发酵的培养液； 

2)将含Eubacterium limosum ZL-II CGMCC NO.6846的菌液接种于步骤1)制备的培养基中，37℃培养48h即得。 

所述方法中，所述步骤1)中，含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物与培养基基础的质量体积比为2∶1；所述质量的单位以g计，体积的单位以L计。 

所述方法中，所述步骤1)中，所述将含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物加入培养基基础中后，还要121℃高压灭菌15min，然后室温放置备用。 

所述方法中，所述步骤2)中，所述菌液与步骤1)制备的培养基的体积比为1∶5；所述含Eubacterium limosum ZL-II CGMCC NO.6846的菌液的OD₆₀₀为1.826。 

所述的方法中，所述培养基基础具体为庖肉培养基基础，其组成为：蛋白胨30.0g/L，牛肉粉5.0g/L，酵母5.0g/L，葡萄糖3.0g/L，磷酸二氢钾5.0g/L，可溶性淀粉2.0g/L，溶剂为水。 

所述含Eubacterium limosum ZL-II CGMCC NO.6846的菌液的制备方法为：取Eubacterium limosum ZL-II CGMCC NO.6846的冻存液室温融化，加入厌氧液体培养基中37℃培养24h后，如此循环进行菌株的扩增。 

所述含Eubacterium limosum ZL-II CGMCC NO.6846的菌液的制备方法中，所述冻存液与厌氧液体培养基的体积比为1∶5；之后重复按照体积比1∶10的比例接种于厌氧液体培养基中扩大体系增菌，直至获得OD₆₀₀＝1.826的500ml菌液。 

所述厌氧液体培养基的组成为：蛋白胨15.0g/L，酵母5.0g/L，大豆蛋白胨5.0g/L，牛肉粉5.0g/L，葡萄糖5.0g/L，氯化钠5.0g/L，可溶性淀粉3.0g/L，半胱氨酸0.5g/L，磷酸二氢钾2.5g/L，血红素0.005g/L，和维生素K₁0.001g/L，溶剂为水。 

所述含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物具体为从菊科水飞蓟属植物水飞蓟 Silybum marianum果实中采用甲醇提取的黄酮类化合物的混合物，该黄酮类化合物的混合物主要包括水飞蓟素，所述水飞蓟素包括水飞蓟宾、异水飞蓟宾、水飞蓟宁和水飞蓟亭。 

所述含有式Ⅴ-式Ⅷ所示化合物的混合物具体为每18.0g的混合物中，含式Ⅴ所示化合物5.006％、式Ⅵ所示化合物7.692％、式Ⅶ所示化合物24.006％和式Ⅷ所示化合物14.726％，所述百分数为质量百分含量。