[发明专利]一种产油脂的内生细菌及其应用

权利要求书

1.一种产油脂的内生细菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HB1310，该枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HB1310的保藏号为CGMCC No.7874。

2.如权利要求1所述的产油脂的内生细菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HB1310，其特征在于，筛选核桃内生细菌枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HB1310的培养基采用G4培养基：D-木糖5g，葡萄糖5g，酵母粉5g，蛋白胨2.5g，NaCl 5g，琼脂22 g，pH7.0，水1000 mL，110℃灭菌30 min。

3.如权利要求1所述的产油脂的内生细菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HB1310的发酵方法，其特征在于，将菌种枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HB1310CGMCC No.7874经过斜面活化培养基培养24-48 h，挑取斜面活化的菌种3-5环接种于种子培养基中，500 mL三角瓶装液量100 mL，于30℃、120-150 r/min振荡培养18-24 h，调节OD₆₀₀＝0.8-1.0，按10％接种量接种于纯糖发酵培养基I、II、III和秸秆水解糖液发酵培养基中，于30℃、120-150 r/min振荡培养120 h，每24 h取样检测产油率和还原糖利用率；

上述使用的培养基分别为：

斜面活化培养基采用G4培养基：D-木糖5 g，葡萄糖5 g，酵母粉5 g，蛋白胨2.5 g，NaCl 5 g，琼脂22 g，pH7.0，水1000 mL，110℃灭菌30 min；

种子培养基：D-木糖5 g，葡萄糖5 g，酵母粉5 g，蛋白胨2.5 g，NaCl 5 g，MgSO₄ 0.5 g，KH₂PO₄ 0.25 g，pH7.0，水1000 mL，110℃灭菌30 min；

纯糖发酵培养基I：葡萄糖20 g，酵母粉10 g，蛋白胨10 g，KH₂PO₄ 0.5 g，MgSO₄·7H₂O 1 g，pH6.5-7.0，水1000 mL，110℃灭菌30 min；

纯糖发酵培养基II： D-木糖20 g，酵母粉10 g，蛋白胨10 g，KH₂PO₄ 0.5 g，MgSO₄·7H₂O 1 g，pH6.5-7.0，水1000 mL，110℃灭菌30 min；

纯糖发酵培养基III：葡萄糖10 g，D-木糖10 g，酵母粉10 g，蛋白胨10 g，KH₂PO₄ 0.5 g，MgSO₄·7H₂O 1 g，pH6.5-7.0，水1000 mL，110℃灭菌30 min。

4.如权利要求3所述的产油脂的内生细菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HB1310的发酵方法，其特征在于，所述的秸秆水解糖液发酵培养基按糖浓度为5%-7%的水解糖液1000 mL， (NH₄)₂SO₄1 g，MgSO₄ 1 g，KH₂PO₄ 0.5 g，酵母粉3 g， pH6.5-7.0，110℃灭菌30 min；秸秆水解糖液的制备采用1%-4%H₂SO₄于110-121℃水解粉碎的秸秆，糖液经Ca(OH)₂沉淀和大孔吸附树脂脱色后调节还原糖浓度为 5%-7%，所涉及到的%按w/v计。

5.一种如权利要求1所述的产油脂的内生细菌为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）HB1310在生产单细胞油脂中的应用。