[发明专利]黑青稞籽皮类黄酮及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种黑青稞籽皮类黄酮的制备方法，将未经粉碎的黑青稞籽皮分别经乙醇粗提、絮凝剂纯化、乙酸乙酯萃取和富集，得到黑青稞籽皮类黄酮。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述粗提，是将黑青稞籽皮加入浓度为20％-60％（体积百分比浓度）的乙醇中浸提，黑青稞籽皮与乙醇的质量/体积比为1：6-10(g:ml)，调pH值为2.0-5.0，40-60℃水浴2-5h，得到类黄酮粗提物的醇提液；优选粗提条件为乙醇浓度40％，pH2.0，水浴温度50℃，水浴时间3h。

3.根据权利要求1或2所述方法，其特征在于，所述絮凝剂为101絮凝剂；所述纯化为向乙醇粗提的醇提液中加入101絮凝剂，101絮凝剂的添加量为1％-2％（g/100ml），在40-60℃水浴下搅拌，然后在3000-5000r/min条件下离心，取上清液，减压回收，馏出物为类黄酮粗品。

4.根据权利要求1或2或3所述方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）粗提：将黑青稞籽皮加入浓度为20％-60％（体积百分比浓度）的乙醇中浸提，黑青稞籽皮与乙醇的质量/体积比为1：6-10(g:mL)，调pH值为2.0-5.0，40-60℃水浴2-5h，得到类黄酮粗提物的醇提液；

2）纯化：向类黄酮粗提物的醇提液中加入101絮凝剂，101絮凝剂的添加量为1％-2％（g/100ml），在40-60℃水浴下搅拌，然后在3000-5000r/min条件下离心，取上清液，减压回收，馏出物为类黄酮粗品；

3）萃取：用乙酸乙酯对类黄酮粗品进行萃取：先将类黄酮粗品与水按体积比1：5-1：10混合，得到类黄酮粗品水悬液，再将类黄酮粗品水悬液加入乙酸乙酯中，类黄酮粗品水悬液与乙酸乙酯的体积比为1：5-1：10，振荡充分，静置，常温过夜，减压回收，馏出物为类黄酮精制物，在-20℃至-70℃下低温干燥，得到类黄酮精制物粉末；

4）富集：类黄酮精制物粉末溶于去离子水中配成溶液用于上样，用SephadexLH-20柱进行梯度洗脱，洗脱液为不同浓度的乙醇水溶液，水与乙醇的体积比依次为100:0、90:10、50:50、0:100，将洗脱物真空干燥，得到黑青稞籽皮类黄酮。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述步骤1）中优选的提取条件为乙醇浓度40％，pH2.0，水浴温度50℃，水浴时间3h。

6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于：所述步骤2）和步骤3）中减压回收条件为水浴50℃，压力0.09Mpa，冷水冷凝。

7.权利要求1-6任一所述方法获得的黑青稞籽皮类黄酮或中间品，所述中间品包括类黄酮粗提物的醇提液、类黄酮粗品、类黄酮精制物和类黄酮精制物粉末；所述黑青稞籽皮类黄酮纯度为95-98％。

8.权利要求7所述的黑青稞籽皮类黄酮或中间品在制备预防和治疗缺氧损伤药物或中的应用，所述缺氧损伤包括心衰、急性肺损伤、失血、脑缺血、心脑血管疾病、重创、淹溺和急性呼吸窘迫综合征等引起的缺氧症状。

9.权利要求8所述的黑青稞籽皮类黄酮或中间品在制备预防和治疗心、脑缺氧损伤药物中的应用，所述心、脑缺氧损伤包括心悸、胸闷、气促、头晕目眩、记忆障碍、神志不清、机体反应迟钝、酸痛乏力、手脚发麻。

10.根据权利要求8或9所述的应用，其特征在于：所述药物含有黑青稞籽皮类黄酮或中间品；剂型为口服制剂、静脉注射制剂、肌肉注射制剂、皮下注射制剂或腹腔注射制剂；其中，口服制剂的剂型具体可为散剂、溶液剂、颗粒剂、片剂或胶囊等，口服制剂中黑青稞籽皮类黄酮的含量为200mg-500mg/片；注射制剂中黑青稞籽皮类黄酮的含量为50mg-100mg/支。