[发明专利]一种细胞培养基材及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种细胞培养基材，其特征在于，所述细胞培养基材包括脐带成纤维细胞体外培养所分泌的基质。

2.根据权利要求1所述细胞培养基材，其特征在于，所述脐带成纤维细胞取自人源、猪源、鼠源或兔源。

3.一种权利要求1所述细胞培养基材的制备方法，其特征在于，具体步骤为：

S1. 获取脐带成纤维细胞；

S2. 配置诱导培养液；

S3. 在普通细胞培养基材上体外培养脐带成纤维细胞并诱导脐带成纤维细胞分泌基质；

S4. 脱细胞处理；

S5. 干燥、灭菌消毒。

4.根据权利要求3所述细胞培养基材的制备方法，其特征在于，步骤S3所述普通细胞培养基材为商用细胞培养皿、培养板或培养瓶。

5.根据权利要求3所述细胞培养基材的制备方法，其特征在于，步骤S3中所述诱导脐带成纤维细胞分泌基质具体步骤为将脐带成纤维细胞加入步骤S2配置的诱导培养液后培养7~20天，隔日换液。

6.根据权利要求3所述细胞培养基材的制备方法，其特征在于，步骤S2中所述诱导培养液的组成为：培养基α-MEM 80~90%体积比，胎牛血清10~20%体积比，抗生素10~200 U/mL，腺嘌呤0.2~0.25 mM，刺激因子组分。

7.根据权利要求6所述细胞培养基材的制备方法，其特征在于，所述刺激因子组分由抗坏血酸10~100μg/mL，脯氨酸20~60μg/mL，地塞米松100nM~1μM中的一种或几种组成。

8.根据权利要求3所述细胞培养基材的制备方法，其特征在于，步骤S4中所述脱细胞处理为先加入含有NH₄OH和Triton X-100的脱细胞处理液处理，再加入脱氧核糖核酸酶处理。

9.根据权利要求8所述细胞培养基材的制备方法，其特征在于，所述脱细胞处理液由pH7.4的磷酸盐缓冲液配制，含有Triton X-100 1~5%体积比和氨水0.8~5%体积比；所述脱氧核糖核酸酶溶液由pH7.4的磷酸盐缓冲液配制，含有500~800 U/mL脱氧核糖核酸酶。

10.根据权利要求1所述细胞培养基材在间充质干细胞体外扩增中的应用。