[发明专利]一种1,4‑丁二磺酸腺苷蛋氨酸的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸的制备方法。

背景技术

1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionnine1,4-butanedisulfonate)是S-腺苷蛋氨酸（S-adenosyl-L-methionine，简称SAM，SAMe）的1,4—丁二磺酸盐，在临床上用于治疗抑郁症、关节炎、肝功能紊乱等疾患，适用于肝硬化前和肝硬化所致肝内胆汁淤积；适用于妊娠期肝内胆汁淤积。

其化学名称：（±）-5’-[（R*）-[（R*）-3-氨基-3-羧丙基]甲磺基]-5’-脱氧腺苷1,4—丁烷二磺酸盐。其分子式为：C₁₅H₂₃N₆O₅S⁺·C₄H₉O₆S₂·0.65C₄H₁₀O₆S₂；其分子量为748.24。具体结构式可参考中国专利申请CN201210126839.0。

中国专利CN200510019206.x，美国专利USP4990606、USP5128249和欧洲专利EP0162323均阐明了SAM的分离纯化及成盐工艺，其中也包括SAM的1,4—丁二磺酸盐。最近，中国专利申请CN201210126839.0又将制备工艺中的超滤膜过滤步骤置于柱分离过程步骤之后，同时提高了1,4-丁二磺酸的比例。同时CN201210126839.0还对上述专利的缺点进行了描述，然而，其制备方法仍然存在操作步骤繁琐，丁二磺酸含量偏高等缺点，且未说明其中（S）-S-腺苷蛋氨酸与（R）-S-腺苷蛋氨酸的比例是否达到国家进口药品注册标准JX20000239要求。

在注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸标准（国家进口药品注册标准JX20000239）中，对于1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸而言，要求其中的（S）-S-腺苷蛋氨酸占腺苷蛋氨酸总比例为60-75%，现有的制备方法很难制得符合要求的1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸，因此往往在分离纯化后还要额外添加（R）-S-腺苷蛋氨酸至相关比例，并且无法确保产品能够达到原料药标准的要求。

发明内容

本发明所解决的技术问题在于克服了现有技术中1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸的制备方法复杂，产品质量不稳定，纯度低，无法保障制得的产品符合相关原料药标准等缺陷，提供一种1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸的制备方法。本发明的制备方法操作简单，产品收率较高，色泽白，纯度高，制得产品中的（S）-S-腺苷蛋氨酸和（R）-S-腺苷蛋氨酸的比例、1,4-丁二磺酸和腺苷蛋氨酸的比例符合国家进口药品注册标准JX20000239的要求。

本发明通过以下技术方案解决上述技术问题。

本发明提供了一种1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸的制备方法，其包括下述步骤：

（1）调节腺苷蛋氨酸产生菌的发酵液的pH值至2.5～3.0，过滤后得湿菌体，将所述湿菌体干燥至含水量在5～20wt%后，进行冻融处理，所述冻融处理的方法为：将所述湿菌体于-20～-80℃冷冻12～24h，再于20～25℃融化2～4h；所述冻融处理进行的次数为1～3次；将pH值为2～4的无机强酸的水溶液和所述湿菌体混合均匀，于0～10℃下放置1～3h，得含破壁菌体的酸液；其中，所述湿菌体和所述无机强酸的水溶液的体积比为1:3～1:8；

（2）在0～10℃下，将所述含破壁菌体的酸液于陶瓷膜中过滤，过滤的同时向所述陶瓷膜中添加pH值为2～4的无机强酸的水溶液，至滤液中的腺苷蛋氨酸的含量在0.05g/L以下，收集所述滤液；其中，所述陶瓷膜的孔径为20～300nm；

（3）将所述滤液过纳滤膜，浓缩所述滤液至腺苷蛋氨酸的浓度为4～5g/L，得浓缩液A；所述纳滤膜的截留分子量为100～200；

（4）调节所述浓缩液A的pH值至2～5，过中等极性大孔吸附树脂柱，水洗后得流出液B；所述的中等极性大孔吸附树脂柱中的大孔吸附树脂为聚苯乙烯-二乙烯苯树脂；