[发明专利]胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4的HLA-A*0201限制性CTL表位及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，涉及一种抗原细胞毒性T细胞（CTL）表位及其在制药领域中的应用。 

背景技术

胶质瘤是最常见的原发性颅内肿瘤，约占中枢神经系统肿瘤的31%，且近30年来发生率逐年递增。其中，恶性胶质瘤（WHO分类III、IV级）约占所有胶质瘤的77.5%，是34岁以下肿瘤患者的第二位死亡原因，其5年病死率在全身肿瘤中列第三位，仅次于胰腺癌和肺癌。胶质瘤最大的生物学特性是肿瘤细胞呈浸润性生长，难以清除完全，术后易复发。目前治疗的主流方案是以手术为主的综合治疗，即先行手术切除肿瘤，术后加以放疗、化疗、生物靶向治疗等辅助治疗。 

肿瘤特异性免疫治疗由于不伤及无关正常组织，是近年来发展迅速的肿瘤治疗方法。其基本原理是肿瘤抗原多肽在抗原提呈细胞（APC）的作用下以MHC-I-肽复合物的形式被提呈于APC表面（与MHC-I类分子结合的抗原多肽被定义为CTL表位），CTL通过其T细胞受体特异识别APC表面的MHC-I-肽复合物而得以活化，最终特异识别存在于肿瘤细胞表面的抗原多肽而特异杀伤肿瘤细胞。因此，寻求特异肿瘤抗原及其相应的CTL表位是肿瘤特异性免疫治疗的关键。 

胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白（CPEBs）是一组介导mRNA胞质多聚腺苷酸化和翻译的RNA结合蛋白。近年来，人们发现其在大多数肿瘤细胞中有异常表达现象。胞质多聚腺苷酸化成分结合蛋白4（CPEB4）是CPEBs家族中的一员。文献报道，CPEB4能激活与肿瘤发育有关的数百个基因，将健康细胞变成癌细胞，因此抑制CPEB4有望为治疗癌症开辟全新途径。 

由于HLA-A*0201是中国人群最为常见的HLA-I类分子的型别，阳性率高达50%，同时也是北美高加索人种最常见的HLA-I类分子的型别，阳性率高达98%。因此，鉴定出肿瘤特异抗原的HLA-A*0201限制性CTL表位，将会为中国人群和北美高加索人群中的恶性肿瘤患者提供免疫治疗的基础。 

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供CPEB4的HLA-A*0201限制性CTL表位，从而 为中国人群和北美高加索人群中CPEB4表达异常升高的恶性肿瘤患者提供免疫治疗的基础；目的之二在于提供CPEB4的HLA-A*0201限制性CTL表位在制药领域中的应用。 

为达到上述目的，经研究，本发明提供如下技术方案： 

1.CPEB4的HLA-A*0201限制性CTL表位，其氨基酸序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示。 

2.CPEB4的HLA-A*0201限制性CTL表位在制备胶质瘤治疗性肽疫苗中的应用。 

本发明的有益效果在于：本发明提供了CPEB4的HLA-A*0201限制性CTL表位，该CTL表位能够以高亲和力结合HLA-A*0201，所形成的复合物稳定，能够诱导肽特异性的CTL应答，刺激肽特异性CTL分泌高水平的IFN-γ，并对胶质瘤细胞产生特异性杀伤效应，从而为中国人群和北美高加索人群中CPEB4表达异常升高的胶质瘤患者提供了免疫治疗的基础，其可用于制备胶质瘤治疗性肽疫苗，在胶质瘤特异性免疫治疗领域有着潜在、良好的开发应用前景。 

附图说明

为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明： 

图1为CTL表位P1与HLA-A*0201的复合物模型。 

图2为CTL表位P2与HLA-A*0201的复合物模型。 

图3为CTL表位P3与HLA-A*0201的复合物模型。 

图4为CTL表位P1的分子动力学模拟构象。 

图5为CTL表位P2的分子动力学模拟构象。 

图6为CTL表位P3的分子动力学模拟构象。 

图7为CTL表位肽P1、P2、P3与HLA-A*0201的亲和力检测结果。 

图8为CTL表位肽P1、P2、P3与HLA-A*0201的复合物稳定性检测结果。 

图9为CTL表位肽P1、P2、P3刺激肽特异性CTL杀伤靶细胞的能力检测结果。 

图10为CTL表位肽P1、P2、P3刺激肽特异性CTL分泌IFN-γ的能力检测结果。 

具体实施方式

下面将结合附图，对CPEB4的HLA-A*0201限制性CTL表位的结构及其活性进行详细的描述。