[发明专利]一种利用枯草芽孢杆菌表达外源蛋白的方法

权利要求书

1.一种利用枯草芽孢杆菌表达外源蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1）将外源蛋白基因插入枯草芽孢杆菌分泌表达载体得到外源蛋白枯草芽孢杆菌分泌表达载体；

2）外源蛋白枯草芽孢杆菌分泌表达载体在枯草芽孢杆菌中高效表达，分泌外源蛋白；

3）将步骤2)分泌的外源蛋白经亲和层析纯化外源蛋白。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的外源蛋白基因为SUMO-CBF基因。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的SUMO-CBF基因序列为如SEQ ID NO:1所示。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的融合蛋白基因为SUMO protease 1基因。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的融合蛋白基因为SUMO protease 1基因，所述的步骤2)分泌的外源蛋白先经阳离子交换，然后经亲和层析纯化。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的SUMO protease 1优化后的基因序列如SEQ ID NO:2所示。

7.一种利用枯草芽孢杆菌表达重组抗菌肽CBF外源蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

a）用所述的权利要求5中所得的纯化SUMO protease 1切割所述的权利要求2中所得的纯化SUMO-CBF，释放重组抗菌肽CBF；

b）用亲和层析和阳离子交换纯化a)所得到的重组抗菌肽CBF。