[发明专利]一种快速检测麻疹病毒/风疹病毒的核酸检测试剂盒有效
申请号: | 201310276514.5 | 申请日: | 2013-07-02 |
公开(公告)号: | CN103409554A | 公开(公告)日: | 2013-11-27 |
发明(设计)人: | 李荣宇;王国强;刘中华;杨静;张旭 | 申请(专利权)人: | 江苏硕世生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
代理公司: | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人: | 孙皓晨;费碧华 |
地址: | 225300 江苏省泰*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 快速 检测 麻疹病毒 风疹病毒 核酸 试剂盒 | ||
1.一种快速检测麻疹病毒/风疹病毒的核酸检测试剂盒,包括以下各组分:RT-PCR反应液、酶混合液、麻疹病毒/风疹病毒反应液、阳性对照和阴性对照。
2.根据权利要求1所述的核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的麻疹病毒/风疹病毒反应液包括以下2组组分:
组分(1):由一对检测麻疹病毒的引物和一条检测麻疹病毒的探针组成;其中,两条引物的碱基序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示;探针的碱基序列为SEQ ID No.3所示,该探针的5′端标记有荧光报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团;
组分(2):由一对检测风疹病毒的引物和一条检测风疹病毒的探针组成;其中,两条引物的碱基序列分别为SEQ ID No.4和SEQ ID No.5所示;探针的碱基序列为SEQ ID No.6所示,该探针的5′端标记有荧光报告基团,3′端标记有荧光淬灭基团。
3.根据权利要求2所述的核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的荧光报告基团选自FAM、HEX、JOE、TET、CY3、CY5、ROX、Texas Red或LC RED640等荧光报告基团,且组分(1)和组分(2)中的荧光报告基团不同;所述的荧光淬灭基团选自BHQ1、BHQ2、BHQ3、Dabcy1或Tamra等任意两种荧光淬灭基团。
4.根据权利要求2所述的核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的检测麻疹病毒的引物及探针的配比为:SEQ ID No.1∶SEQ ID No.2∶SEQ ID No.3为5∶5∶2;优选的,引物SEQ ID No.1为500nM,SEQ ID No.2为500nM,探针SEQ ID No.3为200nM。
5.根据权利要求2所述的核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的检测风疹病毒的引物及探针的配比为:SEQ ID No.4∶SEQ ID No.5∶SEQ ID No.6为5∶5∶2;优选的,引物SEQ ID No.1为500nM,SEQ ID No.2为500nM,探针SEQ ID No.3为200nM。
6.根据权利要求1所述的核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的RT-PCR反应液包括10×缓冲液、25mM MgCl2和10mM dNTPs。
7.根据权利要求1所述的核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的酶混合液包括Taq酶和逆转录酶,其中,Taq酶为热启动Taq酶,逆转录酶为M-MLV逆转录酶。
8.根据权利要求1所述的核酸检测试剂盒,其特征在于,所述的阳性对照为灭活的病毒培养液;所述的阴性对照为去RNA酶水。
9.权利要求1-8所述的核酸检测试剂盒在检测麻疹病毒/风疹病毒中的应用。
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