[发明专利]一种褐藻多糖硫酸酯的质量分析方法

权利要求书

1.一种褐藻多糖硫酸酯的质量分析方法，其特征在于，所述褐藻多糖硫酸酯的质量分析方法利用HPLC-柱后衍生-荧光检测法对褐藻多糖硫酸酯进行含量分析，其色谱条件为：色谱柱采用至少一根以上适合多糖的分离范围为2,000~1,000,000 道尔顿的色谱柱组成；流动相采用50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液（pH 6.7）－乙腈（87:17，V/V）；流速为 0.1 mL/min – 1.0 mL/min；柱温为：20-40℃；

柱后衍生条件：衍生试剂：50 - 500 mmol/L盐酸胍；反应液：0.1 - 2.0 mol/L氢氧化钠；衍生液流速：0.2-0.5 mL/min；冷却液：0.5 mol/L氢氧化钠；冷却液流速：0.1 - 0.5 mL/min；柱后反应器温度：70-130 ℃；

荧光检测条件：激发波长Ex=255 nm；检测器发射波长Em=430 nm；

检测方法采用外标法，以高纯度褐藻多糖硫酸酯作为标准。

2.如权利要求1所述的褐藻多糖硫酸酯的的质量分析方法，其特征在于，应用于药代动力学分析时，生物样品前处理步骤为：将血清或组织匀浆液中加入 0.1~1.0 mol/L 氯化钠；根据褐藻多糖硫酸酯分子量大小，采用截留分子量大于褐藻多糖硫酸酯分子量范围的膜进行超滤离心。

3.如权利要求1所述的褐藻多糖硫酸酯的的质量分析方法，其特征在于，所述质量分析方法的色谱条件为：色谱柱：Shodex Asahipak GS-320 HQ（300 mm×7.6 mm）；柱温箱温度：室温；流动相：50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液（pH 6.7）—乙腈（87:17，V/V）；高效液相系统的流速：0.5 mL/min；进样体积：20 μL；

柱后衍生条件：

反应系统条件：衍生反应液浓度：0.5 mol/L氢氧化钠和200 mmol/L盐酸胍，衍生液流速：0.3 mL/min；冷却液：0.5 mol/L氢氧化钠，冷却液流速：0.3 mL/min；柱后反应器温度：125℃；

荧光检测条件：检测器激发波长Ex=255 nm；检测器发射波长Em=430 nm；PMT=14或17。

4.如权利要求1所述的褐藻多糖硫酸酯的的质量分析方法，其特征在于，所述质量分析方法的色谱条件为：色谱柱：Shodex Asahipak GS-320 HQ（300 mm×7.6 mm），加保护住：Shodex Asahipak GS-2G 7B（50mm×7.6mm）；柱温箱温度：室温；流动相：50 mmol/L磷酸二氢钾缓冲液（pH 6.7）—乙腈（87:17，V/V）；高效液相系统的流速：0.5 mL/min；进样体积：20 μL；

检测器激发波长Ex=255 nm；检测器发射波长Em=430 nm；PMT=14或17；

衍生反应系统条件：

衍生反应液浓度：0.5 mol/L氢氧化钠和200 mmol/L盐酸胍，衍生液流速：0.3 mL/min；冷却液：0.5 mol/L氢氧化钠，冷却液流速：0.3 mL/min；柱后反应器温度：125℃。