[发明专利]一种检测锂离子的方法及试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物检测领域。具体地，本发明提供了一种检测锂离子浓度的方法及试剂盒。

背景技术

1949年澳大利亚精神病学家Cade意外地发现了碳酸锂治疗双相情感障碍的作用，创造了精神病治疗史上的奇迹。锂盐在1970年被FDA批准为治疗躁狂抑郁症药物。碳酸锂常被用来治疗双相型障碍(bipolar disorder)，它通过稳定钙和血清素来稳定情绪，因锂盐不和蛋白质结合，清除途经单一(通过肾脏排泄)，血锂浓度范围小(约为0.4～1.5mmol/L)，几乎所有病例在血锂浓度为2.0mmol/L或更高时出现不良反应。有文献报道锂盐治疗最低中毒浓度为1.6mmol/L，因此病人在使用此药的过程中需要进行血药浓度监测。

目前，医院使用较多的是火焰光度法和离子选择电极测量法测量，前者成本低，但误差较大，不能及时准确的检测出结果，后者是目前里医院使用较多的方法，但使用的电解质分析仪出故障的概率较高，特别是对吸样针的维护，增加了检测成本，而且重复性较差，还需要专门购买这种分析仪和培训相关的操作人员。

因此，目前研发一种操作简便、成本低、重复好的检测血清锂离子浓度的方法，是具有重要意义的。

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简便、快捷、成本低、重复性好的检测锂离子的方法。

本发明的另一目的是提供一种用于上述检测方法的试剂盒。

在本发明的第一方面中，提供了一种测定样本中锂离子的方法，包括步骤：

(1)提供一液态混合体系，所述体系含有待测样本、3,5-二磷酸腺苷和3,5-二磷酸核苷酸酶；

(2)在3,5-二磷酸核苷酸酶的催化下，在所述混合体系中进行如下反应：

3,5-二磷酸腺苷→单磷酸腺苷

(3)测量所述体系中单磷酸腺苷存在与否和/或数量和/或生成率，并换算得出样本中锂离子的测量结果。

在另一优选例中，所述的待测样本是液态的；较佳地是含水样本；更佳地为血清或血液样本。

在另一优选例中，所述的待测样本不含或基本上不含单磷酸腺苷。

在另一优选例中，所述的待测样本是经处理的或未经处理的样本。

在另一优选例中，在步骤(3)中，所述单磷酸腺苷进一步催化反应得到可检测的有色物质醌。

在另一优选例中，步骤(3)还包括步骤：将单磷酸腺苷的存在与否和/或生成率和/或数量与标准值或标准曲线进行比对，从而得出样本中锂离子的测量结果。

在另一优选例中，在步骤(3)中，测定单磷酸腺苷数量和/或生成率的方法，包括步骤：

(3-1)在5-核苷酸酶、腺苷脱氨酶、多核苷酸磷酸化酶、黄嘌呤氧化酶存在下，将步骤(2)的反应体系或将体系中的单磷酸腺苷进行如下反应：

单磷酸腺苷→次黄嘌呤→过氧化氢

(3-2)测量步骤(3-1)的反应体系中过氧化氢的生成率和/或数量，并得出单磷酸腺苷的测量结果。

在另一优选例中，在步骤(3-2)中，测定过氧化氢数量的方法包括步骤：

在过氧化物酶、4-氨基安替比林、4-氯酚的存在下，将步骤(3-2)的反应体系中的过氧化氢进行显色反应，测定反应体系的吸光度或吸光度变化率，从而得出过氧化氢的生成率和/或数量。

在另一优选例中，步骤(1)中，所述混合体系中还含有5-核苷酸酶、腺苷脱氨酶、多核苷酸磷酸化酶、黄嘌呤氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、4-氯酚；且步骤(2)和步骤(3)由如下步骤(ii)和步骤(iii)代替：

(ii)在3,5-二磷酸核苷酸酶、5-核苷酸酶、腺苷脱氨酶、多核苷酸磷酸化酶、黄嘌呤氧化酶的催化下，在所述混合体系中进行如下反应：

3,5-二磷酸腺苷→单磷酸腺苷→次黄嘌呤→过氧化氢；和

在过氧化物酶、4-氨基安替比林、4-氯酚的存在下，过氧化氢进行显色反应；和

(iii)测量所述体系的吸光度或吸光度变化速率，并得出样本中锂离子的测量结果。

在另一优选例中，步骤(iii)还包括步骤：将吸光度或吸光度变化速率与第三标准值或第三标准曲线进行比对，从而得出样本中锂离子的测量结果。

在另一优选例中，所述的3,5-二磷酸腺苷浓度为20～60mmol/L。

在另一优选例中，所述的3,5-二磷酸核苷酸酶浓度为1～6ku/L。

在另一优选例中，所述的5-核苷酸酶浓度为1～3ku/L。

在另一优选例中，所述的腺苷脱氨酶浓度为1～3ku/L。