[发明专利]一种微生物腐熟菌剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一种微生物腐熟菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

随着农业、畜牧业的集约化程度加大，农牧业废弃物的无害化处理及循环利用成为环境保护和农户增收急需解决的问题。

腐熟菌剂可以加快农作物秸秆的腐熟速度，提高腐熟效果，可避免直接使用秸秆、畜禽粪便导致的作物烧根、病虫草害及土壤肥力平衡导致的作物减产。农作物秸秆自然腐熟需要8个月左右的时间，但是两茬作物之间的倒茬时间不到1个月，所以必须使用快速腐熟剂，加快秸秆及人畜粪便的腐熟进程，才能达到农业生产的需要。目前，作物秸秆大多采取直接还田或违规焚烧的方式处理，畜禽粪便多采取自然堆沤的方式处理，这些方法不但腐熟速度慢、腐熟不彻底而且会带来环境污染。尤其是2008年以来近海频繁暴发浒苔绿藻污染，开发一种快速解决并利用浒苔的方法，不但可以减少环境污染，还能带来经济效益。

发明内容

针对有机废弃物大量堆积或聚集给环境带来的污染及给人们经济生活带来的困扰，本发明提供了一种微生物腐熟菌剂及其制备方法和应用。本发明所述微生物腐熟菌剂可以快速腐熟农牧业废弃物和浒苔，具有腐熟完成时间短、除臭作用明显、杀虫及虫卵彻底等优点。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

一种苏云金芽孢杆菌HDSW-2，其分类命名为苏云金芽孢杆菌Bacillus thuringiensis，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为：CGMCC No.7573。

一种微生物腐熟菌剂，它包括冷解糖芽孢杆菌、嗜热脂肪地芽孢杆菌和苏云金芽孢杆菌，所述三株菌均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为：冷解糖芽孢杆菌为CGMCC No.4519、嗜热脂肪地芽孢杆菌为CGMCC No.7572、苏云金芽孢杆菌为CGMCC No.7573。 

其中，所述腐熟菌剂中三株菌的含菌量为：冷解糖芽孢杆菌50%-60%、嗜热脂肪地芽孢杆菌20%-30%、余量为苏云金芽孢杆菌，按活菌数百分比计算。

本发明还提供了所述的微生物腐熟菌剂的制备方法，它包括以下步骤：

(1) 制备一级种子液：将所述三菌株在温度为30℃-40℃下恒温摇床培养得到一级种子液；

(2) 制备二级种子液：将所述一级种子液接种到二级发酵罐中培养得到二级种子液，培养温度与步骤(1)相同； 

(3) 发酵生产：将所述二级种子液分别转接入生产发酵罐中，通气量为100-150升/分钟；以发酵液中芽孢含量超过80%为指标，终止发酵；

(4) 菌液复配：将三菌株的发酵液混合复配得到微生物腐熟菌剂。

其中，所述步骤(1)摇床转速150-220转/分钟，步骤(2) 二级发酵罐转速为100-150转/分钟，步骤(3)生产发酵罐转速为200-300转/分钟。

所述步骤(2)中二级种子的发酵培养基分别为：

冷解糖芽孢杆菌：玉米粉 0.5-5 g/L，葡萄糖 5-10 g/L，豆饼粉 5-25 g/L，蛋白胨 2-10 g/L，碳酸钙 1-5g/L，磷酸氢二钾 0.1-2 g/L，硫酸镁 0.2-2g/L，硫酸锰0.01-1 g/L，pH值6.5-8.5；

嗜热脂肪地芽孢杆菌：淀粉1-5 g/L，葡萄糖2-10 g/L，豆粕5-30 g/L，蛋白胨1-5 g/L，碳酸钙1-10g/L，磷酸氢二钾0.1-2g/L，硫酸镁0.2-2 g/L，硫酸锰0.01-1g/L，pH值6.0-8.0；

苏云金芽孢杆菌：淀粉2-7 g/L，葡萄糖2-10g/L，豆粕5-20 g/L，蛋白胨0.1-1 g/L，碳酸钙1-10 g/L，磷酸氢二钾0.1-0.5g/L，硫酸镁0.1-0.5 g/L，硫酸锰0.01-1g/L，pH值6.0-7.5。 

其中，所述步骤(3)中发酵培养前10小时转速为200转/分钟，通气量为100升/分钟；10-16小时转速为300转/分钟，通气量为150升/分钟；16小时后至发酵结束，转速为200转/分钟，通气量120升/分钟，三菌株发酵时间为18-24小时。 

本发明还提供了所述的微生物腐熟菌剂在快速腐熟农牧业废弃物和浒苔中的应用。

其中，夏季时腐熟周期为7-20天，冬季时腐熟周期为15-30天。