[发明专利]一种茄枝多糖的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种茄枝多糖的制备方法，其特征在于制备方法如下：

(1)预处理：将茄子根茎洗净，烘干，粉碎，得茄子根茎粉；

(2)脱脂：取茄子根茎粉，加入乙醇，加热回流，弃去溶剂，剩余残渣自然风干，得脱脂后的茄子根茎粉；

(3)提取：向脱脂后的茄子根茎粉中加入蒸馏水，温度60℃浸提2小时后，过滤，滤液浓缩，再将浓缩液与乙醇混合，于4℃环境静置，离心分离，沉淀冷冻干燥，得到茄枝多糖粗品；

(4)纯化：将茄枝多糖粗品溶于蒸馏水中，加入三氯乙酸溶液，4℃静置，过滤，得滤液，向滤液中加入滤液重量5-10%的木瓜蛋白酶，调节pH=5，60℃酶解1小时，得产物，产物冷冻干燥即为纯化的茄枝多糖；

(5)分离：将纯化的茄枝多糖溶于双蒸水中，上样于DEAE-D22纤维素柱上，用梯度混合器配制成浓度为0—2mol/L的NaCl溶液作为洗脱剂，以1ml/min的流速进行梯度洗脱，每2ml收集一管，用苯酚—硫酸法跟踪检测至无糖，测定每管中溶液的吸光度值，合并主峰所对应的所有管的溶液，透析除盐，再上样于Sephadex G-100柱，以双蒸水为洗脱剂，以1ml/min的流速进行洗脱，每2mL收集一管，用苯酚—硫酸法跟踪检测至无糖，测定每管中溶液的吸光度值，合并主峰所对应的所有管的溶液，旋蒸浓缩，冻干，即得分离纯化后的茄枝多糖。

2.如权利要求1所述的一种茄枝多糖的制备方法，其特征在于制备方法如下：

(1)预处理：将茄子根茎洗净，烘干，粉碎，得茄子根茎粉；

(2)脱脂：取茄子根茎粉，加入茄子根茎粉10倍体积的95%乙醇，加热回流2次，每次2小时，弃去溶剂，剩余残渣自然风干，得脱脂后的茄子根茎粉；

(3)提取：向脱脂后的茄子根茎粉中，按料液比1:80加入蒸馏水，温度60℃浸提2小时后，过滤，滤液浓缩，再将浓缩液与75%乙醇按1:3体积比混合，于4℃环境静置12小时，离心分离，沉淀冷冻干燥，即得到茄枝多糖粗品；

(4)纯化：将茄枝多糖粗品与蒸馏水，按料液比1:30混合溶解，然后向茄枝多糖粗品溶液中加入等体积的7%三氯乙酸溶液，充分混匀，4℃静置4小时，过滤，得滤液，向滤液中加入滤液总重量7%的木瓜蛋白酶，调节pH=5，60℃酶解1小时，得产物，产物冷冻干燥，即为纯化的茄枝多糖；

(5)分离：将纯化的茄枝多糖溶于双蒸水中，制备成10mg/ml的溶液，上样于DEAE-D22纤维素柱上，用梯度混合器配制成浓度为0—2mol/L的NaCl溶液作为洗脱剂，通过恒流泵，以1ml/min的流速进行梯度洗脱，并且每2ml收集一管，用苯酚—硫酸法跟踪检测至无糖，测定每管中溶液的吸光度值，合并主峰所对应的所有管的溶液，透析除盐，冻干，再将冻干后的产物溶于双蒸水中，配制成浓度为10mg/ml的溶液，再上样于Sephadex G-100柱，以双蒸水为洗脱剂，通过恒流泵，以1ml/min的流速进行洗脱，每2mL收集一管，用苯酚—硫酸法跟踪检测至无糖，测定每管中溶液的吸光度值，合并主峰所对应的所有管的溶液，旋蒸浓缩，冻干，即得分离纯化后的茄枝多糖。

3.按照权利要求1或2所述的方法制备的分离纯化后的茄枝多糖在制备具有抗氧化、提高免疫力的药品、食品或保健品中的应用。