[发明专利]一种抗感染细胞及其制备方法在审
申请号: | 201310189037.9 | 申请日: | 2013-05-20 |
公开(公告)号: | CN104178455A | 公开(公告)日: | 2014-12-03 |
发明(设计)人: | 刘志华;秦环龙;汪建平 | 申请(专利权)人: | 刘志华 |
主分类号: | C12N5/10 | 分类号: | C12N5/10;C12N15/31;C12N15/63;A61K48/00;A61P1/00;C12R1/91 |
代理公司: | 上海精晟知识产权代理有限公司 31253 | 代理人: | 冯子玲 |
地址: | 510655 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 感染 细胞 及其 制备 方法 | ||
1.一种抗感染细胞,其特征在于,所述抗感染细胞为表达I58基因的肠上皮细胞。
2.根据权利要求1所述抗感染细胞,其特征在于,将含有I58基因的重组载体转化正常肠上皮细胞中,得到表达I58基因的肠上皮细胞。
3.一种制备权利要求1所述抗感染细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1,依据I58基因序列设计扩增引物,经PCR克隆I58基因片段;
步骤2,将所得I58基因片段克隆至表达载体中,获得重组载体;
步骤3,转化所述重组载体至正常肠上皮细胞中,得到抗感染细胞。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,在扩增引物设计过程中,使所设计的上游引物在I58基因上游引入BglⅡ酶切位点;使所设计的下游引物在I58基因下游引入XhoⅠ酶切位点。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤1中所述扩增引物如下:
上游引物:5’-atcAAGCTTTTTTCAGTTCAAAATGGTTA-3’;
下游引物:5’-atcctcgagAGTTTTCATCTTAACAACCT-3’;
其中所述上游引物中atc为BglⅡ酶切位点,所述下游引物中atcctcgag为XhoⅠ酶切位点。
6.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述表达载体为含有BglⅡ酶切位点和XhoⅠ酶切位点的表达载体。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述表达载体为pET32载体。
8.一种如权利要求1所述抗感染细胞在制备预防和修复肠损伤药物或材料中的应用。
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