[发明专利]一种CD34-SG17多肽片段及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种CD34-SG17多肽片段，其特征在于，所述多肽片段的核苷酸序列如SEQ ID N0.1所示。

2.一种制备根据权利要求所述的CD34-SG17多肽片段的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a）提供9-芴基甲氧羰酰基保护的氨基酸（Fmoc-AA）并使其活化，得到活化氨基酸；

b）将所述活化氨基酸与P-羟甲基苯氧甲基多聚乙烯树脂（HMP树脂）反应，得到连接有氨基酸的树脂；

c）脱除所述连接有氨基酸的树脂的Fmoc保护基；

d）将脱除Fmoc保护基的连接有氨基酸的树脂进行活化，将活化后的树脂与过量的活化羧基组份偶联，并脱去偶联后活化氨基组份的氨基保护基；

e）重复步骤a）至步骤d）17次，得到肽树脂；

f）将所述肽树脂分离，得到CD34-SG17多肽化合物粗品。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，在步骤a）中，所述Fmoc-AA通过与人多巴胺脱羧酶（DCC）和羟基苯并三唑（HOBT）反应活化。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述活化羧基组份从左到右依次为：丝氨酸、赖氨酸、亮氨酸、谷氨酰胺、亮氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、赖氨酸、组氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、天门冬酰胺、亮氨酸、精氨酸、赖氨酸、甘氨酸和半胱氨酸。

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤f）包括：

f-1）用三氟乙酸(TFA)结合清除剂与所述肽树脂反应，以将所述CD34-SG17多肽片段从肽树脂上分离；

f-2）反应后过滤掉树脂，并通过减压蒸馏出去所述清除剂；

f-3）将所述CD34-SG17多肽片段用水溶解后，用萃取液萃取，得到CD34-SG17多肽化合物粗品。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述清除剂为1，2-乙二硫醇（EDT）、硫代苯甲醚和水的混合溶液，步骤f-1）的反应时间为3h。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述萃取液为乙醚。

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，还包括步骤：

g）采用高效液相色谱将所述CD34-SG17多肽化合物粗品分离纯化，得到CD34-SG17多肽片段。

9.根据权利要求1所述的CD34-SG17多肽片段在制备CD34流式抗体中的应用。

10.根据权利要求1所述的CD34-SG17多肽片段在制备检测CD34流式抗体试剂盒中的应用。