[发明专利]一种改良的高灵敏高效的检测和鉴定转基因小麦的方法

权利要求书

1.一种高灵敏高效的检测和鉴定转基因小麦的方法，其包括下述步骤：

1)通过N₂O气体预处理并酶解转基因小麦和对照材料的根尖分生区细胞分裂旺盛的组织获得图像清晰、染色体分散良好的中期分裂相标本；

2)利用切口平移方法标记所需检测的目的片段的荧光探针；

3)利用步骤2)构建的所需检测的目的片段的荧光探针对利用步骤1)转基因小麦中期分裂相染色体进行荧光原位杂交；

4)分析步骤3)得到的荧光原位杂交结果，和对照材料进行比对确定待检测转基因小麦中荧光信号的分布。

2.权利要求1所述的方法，其中步骤1)包括下述步骤：(a)N₂O气体预处理：取合适的根尖，放在湿润的离心管里，放入N₂O气室中处理0.5-5小时，N₂O的压强为10ATM(1.01Mpa)；(b)将N₂O气体预处理的根尖固定；(c)酶解处理：将固定好的根尖用水洗涤，切下根尖分生组织，用果胶酶和纤维素酶处理30min-2h。

3.权利要求1所述的方法，其中步骤2)通过酶切分离转基因载体中的目的片段，借助切口平移方法对目的基因扩增产物进行荧光探针标记，所述目的片段为转基因载体携带的基因片段。

4.一种获取形态良好的中期分裂相的植物染色体的方法，所述方法包括下述步骤：

(a)N₂O气体预处理：取所述植物合适的根尖或芽尖，放在湿润的离心管里，放入N₂O气室中处理0.5-5小时，N₂O的压强为10ATM(1.01Mpa)；(b)将N₂O气体预处理的根尖或芽尖固定；(c)酶解处理：将固定好的根尖或芽尖用水洗涤，切下根尖或芽尖分生组织，用果胶酶和纤维素酶处理30min-2h。

5.权利要求4所述的方法，其中所述植物包括单子叶植物或双子叶植物。

6.权利要求4所述的方法，其中所述植物选自小麦、短柄草、海带、大豆、番茄、棉花、梨、百合或高粱。