[发明专利]天然产物TubulysinU的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于药物技术领域，具体地说，涉及Tubulysin U的制备方法。

背景技术

2000年，等人首次报导了一种从粘细菌中分离提取的线性四肽小分子。由于它们主要作用在细胞的微管蛋白细胞骨架(tubulin cytoskeleto)上，因此把这一类化合物命名为Tubulysins。

研究发现，Tubulysins不仅具有很高的抗癌活性(Tubulysin D的IC₅₀约为紫杉醇的100-5000倍，为埃博霉素B的10倍以上)，而且能够有效地抑制耐药性癌细胞的生长，但它的具体作用机理却是与埃博霉素和紫杉醇相反，即促进微管蛋白的聚合。长春碱的作用机理虽与其相似，但活性差很多。另外，Kaur等人还发现Tubulysins还具有抑制血管新生的作用。这些都说明了Tubulysins作为抗癌药的巨大潜力。

通过粘细菌发酵来实现生物合成，但只能合成很少量的Tubulysins，不到4毫克/升，而且还需要几个非常繁琐的纯化步骤，因而不利于工业化生产。

发明内容

本发明提供了一条合成天然产物Tubulysin U(1)的路线。为了实现本发明的上述目的，本发明提供如下的技术方案：

Tubulysin U的制备，该方法包括如下步骤：

其中Tuv片段2的制备方法如下：

孔p片段7的制备方法如下：

具体实施方式

为了理解本发明，下面以实施例进一步说明本发明，但不意于限制本发明的保护范围。

实施例1：TubulysinU(1)的制备

化合物4的合成

向化合物2(0.57g，1.6mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入3.5N盐酸溶液(4.57mL，16mmol)，并使反应液在室温下搅拌3小时。减压蒸掉溶剂后，得到淡黄色固体。将该固体溶于DMF(16mL)中，并依次加入DIEA(1.39mL，8mmol)和活化酯3(0.7g，2mmol)，然后使反应混合液在室温下搅拌40小时。减压蒸掉溶剂，粗品经硅胶层析柱(流动相：乙酸乙酯∶石油醚1∶1)分离纯化得到化合物4(白色固体，0.61g，产率：81％)。M.p.：169-170℃.[α]²⁵D＝+7.8(c＝1.0inCH₂Cl₂).IR3343，3285，1732，1690，1653，1520，1216，1097cm^-1.¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.89-0.96(m，12H)，1.08-1.17(m，1H)，1.44(s，9H)，1.45-1.57(m，1H)，1.74-1.86(m，2H)，1.91-2.01(m，1H)，2.16-2.23(m，1H)，3.90-3.99(m，2H)，3.93(s，3H)，4.85-4.89(m，1H)，5.47(d，J＝3.9Hz，1H)，6.27(d，J＝9.1Hz，1H)，8.14(s，1H).¹³C NMR(CDCl₃，100MHz)δ10.1，14.9，17.3，18.5，23.7，27.3，31.0，34.5，39.7，50.7，51.3，58.7，67.8，79.2，126.7，145.5，155.0，161.0，173.0，176.0.HRMS(ESI)for[C₂₂H₃₈N₃O₆S]⁺：calcd.472.2476，found472.2483.

化合物5的合成