[发明专利]凝血质控品及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及临床凝血检验项目质量控制领域，特别涉及一种用动物血浆制备可同时用于PT、APTT、FIB凝血项目检验的质控品的方法及制得的凝血质控品。

背景技术

哺乳动物血液凝固是一个复杂的生理生化代谢过程，其实质是通过一系列酶促反应，使血浆中呈液态的纤维蛋白原转变成固态的交联纤维蛋白，简称凝血。参与各链锁反应的多种物质称凝血因子，它们的化学本质，除钙离子外，绝大多数为蛋白质。凝血过程可分为凝血酶原激活物的形成、凝血酶原的激活和纤维蛋白的生成三个基本步骤。根据凝血酶原激活物形成的途径不同，血液凝固可分为内源性凝血和外源性凝血。不同的哺乳动物有相同种类的凝血因子并且有高度的同源性，但不同动物的凝血因子含量不同，导致凝血系统功能的检验项目的值有不同。

临床上对凝血系统功能的检验项目主要有：血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FIB）和凝血酶时间（TT）等。其中PT主要是反映外源性凝血系统功能，APTT是内源性凝血因子缺乏最可靠的筛选试验，FIB是血浆中含量最高的凝血因子，参考范围是2.0-4.0g/L，过高或过低都影响凝血系统功能。

随着凝血检验项目不断拓展到疾病诊断和治疗中的各个领域，使用配套的凝血质控物对凝血检验进行室内质量控制也显得尤为重要。目前市场上主要的凝血质控商品多为进口产品，价格昂贵，并且大多数是来源于人血浆。也有国外专利报道利用动物来源的血浆制备凝血质控物，但其只是对PT、APTT两项凝血检测进行临床实验质量评估。因此，提供一种用动物血浆制备可同时用于PT、APTT、FIB凝血项目检验的质控品的方法及制得的凝血质控品具有现实意义。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种使用动物来源血浆制备凝血检测质控品的方法，所制备的凝血质控品PT、APTT、FIB三项凝血检验的值均在正常人凝血指标内，且具有较好的稳定性，可同时满足PT、APTT、FIB三项凝血检验的质量控制需求。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种凝血质控品的制备方法，包括以下步骤：

步骤1：混合动物血浆，获得第一混合血浆，使第一混合血浆中PT、APTT的检测结果在正常人凝血指标内；

步骤2：检测第一混合血浆的FIB值，

第一混合血浆的FIB值低于正常人指标范围，添加纤维蛋白原溶液，获得第二混合血浆；

第一混合血浆的FIB值高于正常人指标范围，通过冷沉淀血浆的方法去除第一混合血浆中纤维蛋白原，获得第三混合血浆；

使第二混合血浆或第三混合血浆的FIB值在正常人指标内；

步骤3：将步骤2获得的第二混合血浆或第三混合血浆添加含有稳定剂的血浆缓冲液，使得检测PT、APTT、FIB值均在正常人凝血指标内，冷冻干燥，即得凝血质控品。

本发明所指检测第一混合血浆的FIB值，如果第一混合血浆的FIB值低于正常人指标范围，添加纤维蛋白原溶液，获得第二混合血浆，使第二混合血浆的FIB值在正常人指标内；如果第一混合血浆的FIB值高于正常人指标范围，通过冷沉淀血浆的方法去除第一混合血浆中部分纤维蛋白原，获得第三混合血浆，使得第三混合血浆的FIB值在正常人指标内。其中，部分不做限定，只要使第三混合血浆的FIB值在正常人指标内即可。

上述制备方法中，步骤1中动物血浆为猪、牛、兔、羊、马、狗的血浆中的一种或两种以上的混合物。

本发明提供的凝血质控品的制备方法中，动物血浆的制备方法为用静脉或动脉穿刺采集动物血液，按血液与抗凝剂体积比为9:1的比例加入2～5%柠檬酸三钠抗凝剂，离心30分钟，相对离心力为2000～2500g，小心分离吸取上层血浆。

本发明选用动物血浆制备凝血质控品，动物来源血浆尤其是非灵长类动物，与人来源血浆相比，凝血因子更加稳定，且可消除感染AIDS或肝炎病毒的风险。不同动物血浆具有不同的水平凝血因子，PT、APTT具有不同的凝集时间，如：兔血浆PT值缩短，猪血浆APTT值缩短，但PT值不缩短，牛血浆PT和APTT值均延长，马血浆APTT值延长，但PT值不缩短。根据不同动物血浆的凝血特性，选择适当类型的动物血浆，并通过调节血浆混合比例，可将混合血浆PT、APTT检测结果控制在正常人凝血指标内，且具有良好的稳定性。

作为优选，上述混合血浆选择猪、牛、兔三种血浆混合，其中，正常人凝血指标为：PT检测值10～14秒，APTT检测值22～38秒。