[发明专利]一种制备重组人干扰素α2b的发酵培养基及发酵方法

权利要求书

1.一种制备重组人干扰素α2b的发酵培养基，其按照重量份其包括以下组分：

胰蛋白胨25-35份，酵母提取物15-25份，磷酸氢二钠4-8份，磷酸二氢钾2-4份，氯化铵0.4-0.6份，氯化钠0.4-0.6份，硫酸镁0. 2-0.4份，氯化钙0.05-0.15份与丙三醇10-20份。

2.根据权利要求1所述的发酵培养基，其特征在于，胰蛋白胨浓度为25-35 g/L，酵母提取物的浓度为15-25 g/L，磷酸氢二钠浓度为4-8 g/L，磷酸二氢钾浓度为2-4 g/L，氯化铵浓度为0.4-0.6g/L，氯化钠浓度为0.4-0.6 g/L，硫酸镁浓度为0. 2-0.4g/L，氯化钙浓度为0.05-0.15 g/L与丙三醇浓度为10-20g/L。

3.一种制备重组人干扰素α2b的发酵方法，其包括以下步骤：

A、按照重量份将胰蛋白胨25-35份，酵母提取物15-25份，磷酸氢二钠4-8份，磷酸二氢钾2-4份，氯化铵0.4-0.6份，氯化钠0.4-0.6份，硫酸镁0. 2-0.4份，氯化钙0.05-0.15份与丙三醇10-20份加入发酵罐中，并向所述发酵罐中加入注射用水充分混合得到培养基；

B、再向所述发酵罐中加入磷酸与50%的氢氧化钠溶液，调节所述培养基的PH值到7.0±0.2，然后再将工程菌菌种接种到所述培养基进行培养，所述发酵罐中培养温度为37℃，得到发酵产物；

C、将所述发酵物采用低温离心法得到菌体，并对所述菌体进行裂解提纯，获得重组干扰素α2b蛋白。

4.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤B还包括：

B1、向所述发酵罐中加入所述磷酸，将所述培养基的PH值调节至4.2±0.2，并在121℃条件下灭菌15分钟；

B2、将灭菌后的所述培养基温度控制在37℃，然后向所述发酵罐中加入50%的氢氧化钠溶液，将所述培养基的PH值调整至7.0±0.2；

B3、发酵培养过程中向所述发酵罐中适时加入磷酸与50%的氢氧化钠溶液，控制所述培养基的PH值为7.0±0.2；随着细菌生长培养基的溶解氧自90%逐渐降低至零。