[发明专利]一种用于转基因水稻筛查的重组标准质粒及试剂盒无效
申请号: | 201310065278.2 | 申请日: | 2013-03-01 |
公开(公告)号: | CN103215346A | 公开(公告)日: | 2013-07-24 |
发明(设计)人: | 汪小福;陈笑芸;徐俊锋;缪青梅;朱妍晴;朱青 | 申请(专利权)人: | 浙江省农业科学院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/63;C12N15/62 |
代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;冷红梅 |
地址: | 310021 *** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 转基因 水稻 重组 标准 质粒 试剂盒 | ||
1.一种用于转基因水稻筛查的重组标准质粒,由如下方法获得:将SEQ IDNo.1所示的CaMV35S基因、SEQ ID No.2所示的SPS基因、SEQ IDNo.3所示的Bt基因、SEQ ID No.4所示的NPTⅡ基因、SEQ ID No.5所示的Htp基因、SEQ ID No.6所示的Bar基因和SEQ ID No.7所示的NOS基因依次连接获得融合片段,再将所得融合片段克隆到载体pUC-19中,获得所述重组标准质粒,记为pUC-RS。
2.如权利要求1所述的重组标准质粒,其特征在于所述融合片段核苷酸序列如SEQ ID No.8所示。
3.如权利要求1所述的重组标准质粒在转基因水稻筛查中的应用。
4.一种用于转基因水稻筛查的检测试剂盒,主要包括权利要求1所述的重组标准质粒和特异性引物;所述特异性引物序列如下:
CaMV35S基因特异性引物:
35S-F:GCTCCTACAAATGCCATCATTGC
35S-R:GATAGTGGGATTGTGCGTCATCCC
SPS基因特异性引物:
SPSF:ATCTGTTTACTCGTCAAGTGTCATCTC
SPS-R:GCCTAGGATTACATATGGCAAGA
Bt基因特异性引物:
Bt-F:GAAGGTTTGAGCAATCTCTAC
Bt-R:CGATCAGCCTAGTAAGGTCGT
NPTⅡ基因特异性引物:
Npt-F:ACTGGGCACAACAGACAATCG
Npt-R:GCATCAGCCATGATGGATACTTT
Htp基因特异性引物:
Hpt-F:GAAGTGCTTGACATTGGGGAGT
Hpt-R:AGATGTTGGCGACCTCGTATT
Bar基因特异性引物:
Bar-F:ACCATCGTCAACCACTACATCG
Bar-R:GCTGCCAGAAACCCACGTCAT
NOS基因特异性引物:
Nos-F:GAATCCTGTTGCCGGTCTTG
Nos-R:TTATCCTA GTTTGCGCGCTA。
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