[发明专利]一种基于低温等离子体制备抗氧化、抗紫外的酵母活性提取物的方法

说明书

技术领域

本发明利用大气压低温等离子体发生装置制备抗氧化、抗紫外的酵母活性提取物的方法，属于低温等离子体技术应用领域。

背景技术

酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)，又称面包酵母或者出芽酵母。酿酒酵母是与人类关系最广泛的一种酵母，在传统上它用于制作面包和馒头等食品及酿酒，也是制作培养基中常用成分酵母提取物的主要原料，在现代分子和细胞生物学中用作真核模式生物，其作用相当于原核的模式生物大肠杆菌。酵母是单细胞微生物，却有着真核细胞的基本结构和功能。酵母由细胞壁、细胞膜、细胞核和细胞质组成。其中蛋白质含量为40％-60％，其蛋白质水解产物包括人体必需的八种氨基酸。除蛋白质外，细胞中还含有丰富的酶系、矿物质、脂肪、糖类、多磷酸、多种B族维生素和维生素D，并且具有许多经济价值很高的生理活性物质和生化试剂，如辅酶A、辅酶Q、细胞色素C、凝血质、麦角固醇、谷耽甘肤和核酸等。通过菌种选育，使酵母富含某种目的产物，大量培养细胞，再从酵母细胞出发，提取有重要经济价值的生物产品，成为酵母利用的重要分支。

活酵母细胞衍生物(Live Yeast Cell Derivative，即LYCD)是酵母活细胞对有控制伤害反应的产物，这样的伤害刺激细胞产生一些能够增加细胞呼吸且促进修复作用的未知因子，LYCD。传统的LYCD可以从经紫外照射培养后酵母细胞中提取。即将酿酒酵母置于286nm的紫外辐射之下，经可控制伤害培养，诱导酵母细胞产生。也可把亚致死剂量的过氧化氢加入到酵母细胞中，用同样的提取过程制备LYCD。LYCD是一种十分复杂的低分子量物质，由氨基酸、单糖和双糖以及酵母特有的痕量维生素和矿物质组成。而传统方法难以实现LYCD的大量生产，并且其制备方法繁琐、费时、费力、对人体有毒害作用。本发明采用了一种物理技术——大气压低温等离子体具有易操作、加工速度快、处理效果好、环境污染小、节能等优点，可以很好的解决传统方法的弊端。

大气压低温等离子体是指在大气压(常压)条件下产生的整体温度较低的等离子体。大气压低温等离子体成分复杂，它是气体在强电场作用下电离而产生一种高度电离的气体云，由电子、多种离子、原子、分子、活性自由基及臭氧03、紫外UV等组成。根据温度和内部的热力学平衡性，可以将等离子体分为高温(热力学平衡态)和低温(热力学非平衡态)等离子体。高温等离子体是指离子与电子温度相同，整体处于热力学平衡状态，体系温度很高(5000——20000K)的等离子体。低温等离子体是指离子温度(300-500K)远远低于电子温度(10000K)的等离子体，这时系统处于热力学非平衡态，表观温度低，因此称为低温等离子体。目前，低压低温等离子体已经在工业领域有了很多成熟的应用，改变了一些行业的生产模式。近年来，大气压强条件下产生低温等离子体技术的实现，使等离子体在杀菌、凝血、抑制肿瘤、治疗皮肤病等生物医学领域的研究取得不少成果。

本发明利用大气压低温等离子体发生装置制备抗氧化、抗紫外的酵母活性提取物的方法，属于低温等离子体技术应用领域。该法具有高效、方便增加酵母细胞内活性物质的优点。其制备产物可作为日用品添加剂，起抗紫外、抗氧化、抗老化、保鲜、杀菌、消炎等作用；并且本发明由于采取微生物发酵生产，不受环境和自然资源影响，易实现工业化、自动化；本发明工艺方法的生产成本低，工艺简便、稳定、易调控、成功率高；本发明适合多种规模的企业投资。

发明内容

为了克服传统利用紫外和过氧化氢诱导产生酵母活性提取物方法的不足，本发明提供了一种基于低温等离子体制备抗氧化、抗紫外的酵母活性提取物的方法。本发明利用低剂量的低温等离子体处理酵母细胞悬液，再经破除细胞壁、破除细胞膜提取酵母的活性物质。所采用的低温等离子体可高效诱导产生大量的高活性抗氧化、抗紫外物质，并且其操作工艺具有易操作、加工速度快、处理效果好、环境污染小、节能等优点。

为实现上述目的本发明采用的技术方案如下：

一种基于低温等离子体制备抗氧化、抗紫外的酵母活性提取物的方法，其特征在于，依次按以下步骤进行：

1.1酿酒酵母菌株的选择和培养

所用的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)为Saccharomyces cerevisiae4741MAT a野生型，及其超氧化物歧化酶1(SOD1)和超氧化物歧化酶2(SOD2)的过表达突变株p-Sod1，p-Sod2。

具体培养方法如下：

1.1.1酵母培养基YAPD的配制