[发明专利]脱细胞纤维环基质的制备方法有效

专利信息
申请号: 201310020971.8 申请日: 2013-01-21
公开(公告)号: CN103007352A 公开(公告)日: 2013-04-03
发明(设计)人: 徐宝山;杨强;许海委;马信龙;李秀兰;夏群;张春秋 申请(专利权)人: 天津市天津医院
主分类号: A61L27/36 分类号: A61L27/36
代理公司: 天津市宗欣专利商标代理有限公司 12103 代理人: 董光仁
地址: 300211 *** 国省代码: 天津;12
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摘要:
搜索关键词: 细胞 纤维 基质 制备 方法
【权利要求书】:

1.一种脱细胞纤维环基质的制备方法,其是按以下步骤进行的:

(1)取健康成年猪的脊柱纤维环,无菌生理盐水充分漂洗; 

(2)在浓度为10mM,含0.05~0.5% EDTA、5~50 KIU/ml 抑肽酶的Tris缓冲液中4℃振荡48 h;

(3)在浓度为10mM,含0.05~0.5% EDTA、5~50 KIU/ml 抑肽酶的Tris缓冲液中,加入1~5% 的TritonX-100后,室温振荡12~96 h;

(4)放入含0.05~0.5 mg/ml 脱氧核糖核酸酶、5~50 ug/ml核糖核酸酶A的Tris缓冲液,37℃振荡12~36 h;

(5)无菌生理盐水振荡清洗24 h,放在无菌PBS缓冲液中4℃保存。

2.按照权利要求1所述的脱细胞纤维环基质的制备方法,其特征在于:所述的健康成年猪为6~7月龄,雌雄不限。

3.按照权利要求1所述脱细胞纤维环基质的制备方法,其特征在于:所述的脊柱纤维环是外径为5~20 mm,厚度为2~7 mm的尾椎纤维环。

4.按照权利要求1所述的脱细胞纤维环基质的制备方法,其特征在于:所述振荡频率均为80~250 r/min。

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