[发明专利]脱细胞纤维环基质的制备方法有效
申请号: | 201310020971.8 | 申请日: | 2013-01-21 |
公开(公告)号: | CN103007352A | 公开(公告)日: | 2013-04-03 |
发明(设计)人: | 徐宝山;杨强;许海委;马信龙;李秀兰;夏群;张春秋 | 申请(专利权)人: | 天津市天津医院 |
主分类号: | A61L27/36 | 分类号: | A61L27/36 |
代理公司: | 天津市宗欣专利商标代理有限公司 12103 | 代理人: | 董光仁 |
地址: | 300211 *** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 细胞 纤维 基质 制备 方法 | ||
1.一种脱细胞纤维环基质的制备方法,其是按以下步骤进行的:
(1)取健康成年猪的脊柱纤维环,无菌生理盐水充分漂洗;
(2)在浓度为10mM,含0.05~0.5% EDTA、5~50 KIU/ml 抑肽酶的Tris缓冲液中4℃振荡48 h;
(3)在浓度为10mM,含0.05~0.5% EDTA、5~50 KIU/ml 抑肽酶的Tris缓冲液中,加入1~5% 的TritonX-100后,室温振荡12~96 h;
(4)放入含0.05~0.5 mg/ml 脱氧核糖核酸酶、5~50 ug/ml核糖核酸酶A的Tris缓冲液,37℃振荡12~36 h;
(5)无菌生理盐水振荡清洗24 h,放在无菌PBS缓冲液中4℃保存。
2.按照权利要求1所述的脱细胞纤维环基质的制备方法,其特征在于:所述的健康成年猪为6~7月龄,雌雄不限。
3.按照权利要求1所述脱细胞纤维环基质的制备方法,其特征在于:所述的脊柱纤维环是外径为5~20 mm,厚度为2~7 mm的尾椎纤维环。
4.按照权利要求1所述的脱细胞纤维环基质的制备方法,其特征在于:所述振荡频率均为80~250 r/min。
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