[发明专利]一对用于筛选小麦赤霉病抗性的引物序列及其应用有效
| 申请号： | 201310013279.2 | 申请日： | 2013-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN103224978A | 公开（公告）日： | 2013-07-31 |
| 发明（设计）人： | 马鸿翔;王磊;张旭;余桂红;杜军凯 | 申请（专利权）人： | 江苏省农业科学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 江苏圣典律师事务所 32237 | 代理人： | 孙忠浩 |
| 地址： | 210014*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一对 用于 筛选 小麦 赤霉病 抗性 引物 序列 及其 应用 | ||
1.一对用于筛选小麦赤霉病抗性的引物序列，其特征在于：所述的一对特异性引物序列为：上游引物SEQ ID NO.1和下游引物SEQ ID NO.2。
2.如权利要求1所述引物序列的应用，其特征在于：以SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2为引物，以待测小麦基因组DNA为模板进行PCR扩增，再对扩增产物在琼脂糖凝胶中电泳分离检测，若扩增产物中含有236bp大小的条带，则待测小麦品种有赤霉病抗性，为抗病品种，否则待测小麦无赤霉病抗性，为感病品种。
3.根据权利要求2所述的引物序列的应用，其特征在于：
PCR扩增的反应体系为：20-100ng的待测小麦基因组DNA，5U/μL的 Taq酶0.25μL，4μmol/L的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2各1μL，10mmol/L的 dNTP 0.5μL，10×PCR 的Mg2+ Plus缓冲液2.5μL，余量为无菌蒸馏水；
PCR扩增的反应条件为：95℃预变性5min，随后94℃变性30sec, 58℃条件下退火30sec, 72℃ 延伸30sec，进行35个循环；最后72℃延伸10min; 在4℃下保存。
4.根据权利要求2或3所述的引物序列的应用，其特征在于：对扩增产物在琼脂糖凝胶中电泳分离检测的是指：将扩增产物在0.8%－2%的琼脂糖凝胶中电泳分离，EB染色，判断扩增产物中是否含有236bp的条带。
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