[发明专利]核苷酸序列及其方法在审
申请号: | 201280077610.0 | 申请日: | 2012-12-05 |
公开(公告)号: | CN104854240A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 纳加拉杰·戈文达帕;桑卡尔·佩里亚萨米;什瓦库马尔·马德纳哈利·恰纳巴萨帕;苏马·斯里尼瓦斯;克达纳斯·南祖德·萨斯特里 | 申请(专利权)人: | 拜康有限公司 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C12N15/63;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/10;C12N15/113;C07H21/04 |
代理公司: | 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 | 代理人: | 沈敬亭;李海霞 |
地址: | 印度卡*** | 国省代码: | 印度;IN |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 核苷酸 序列 及其 方法 | ||
1.SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。
2.如权利要求1中所述的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列是山梨醇脱氢酶启动子。
3.如权利要求1中所述的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列鉴别和分离自巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)。
4.一种分离SEQ ID No.1的方法,其中所述方法包括以下行为:
a)从巴斯德毕赤酵母中分离基因组DNA;
b)在分离的所述基因组DNA内扩增包含SEQ ID No.1的区域;和
c)对扩增产物进行常规凝胶洗脱程序以分离所述SEQ ID No.1。
5.如权利要求4中所述的方法,其中SEQ ID No.1的扩增是通过SEQ ID No.2所示的正向引物和SEQ ID No.3所示的反向引物进行的。
6.一种在包含非特异性诱导剂的培养基中在SEQ ID No.1的调控下表达基因的方法,其中所述方法包括以下行为:
a)在SEQ ID No.1下游的表达构建体中克隆所述基因;
b)用所述表达构建体转化宿主;和
c)在包含非特异性诱导剂的培养基中在所述SEQ ID No.1的调控下表达所述基因以用于生产异源蛋白。
7.如权利要求6中所述的方法,其中所述宿主是甲基营养型酵母,优选巴斯德毕赤酵母。
8.如权利要求6中所述的方法,其中所述异源蛋白选自包括人白蛋白和刺桐胰蛋白酶抑制剂的组。
9.如权利要求6中所述的方法,其中通过非特异性诱导剂进行所述表达。
10.如权利要求6中所述的方法,其中所述非特异性诱导剂选自包括山梨糖醇、葡萄糖、甘油、果糖、甘露糖醇、乳酸、蔗糖、淀粉、甲醇或它们的任意组合的组。
11.包含如权利要求1中所述的核苷酸序列的载体。
12.包含如权利要求11中所述的载体的转化的宿主细胞。
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