[发明专利]核苷酸序列及其方法在审

专利信息
申请号: 201280077610.0 申请日: 2012-12-05
公开(公告)号: CN104854240A 公开(公告)日: 2015-08-19
发明(设计)人: 纳加拉杰·戈文达帕;桑卡尔·佩里亚萨米;什瓦库马尔·马德纳哈利·恰纳巴萨帕;苏马·斯里尼瓦斯;克达纳斯·南祖德·萨斯特里 申请(专利权)人: 拜康有限公司
主分类号: C12N15/11 分类号: C12N15/11;C12N15/63;C12N15/81;C12N1/19;C12N15/10;C12N15/113;C07H21/04
代理公司: 北京康信知识产权代理有限责任公司 11240 代理人: 沈敬亭;李海霞
地址: 印度卡*** 国省代码: 印度;IN
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摘要:
搜索关键词: 核苷酸 序列 及其 方法
【权利要求书】:

1.SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。

2.如权利要求1中所述的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列是山梨醇脱氢酶启动子。

3.如权利要求1中所述的核苷酸序列,其中所述核苷酸序列鉴别和分离自巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)。

4.一种分离SEQ ID No.1的方法,其中所述方法包括以下行为:

a)从巴斯德毕赤酵母中分离基因组DNA;

b)在分离的所述基因组DNA内扩增包含SEQ ID No.1的区域;和

c)对扩增产物进行常规凝胶洗脱程序以分离所述SEQ ID No.1。

5.如权利要求4中所述的方法,其中SEQ ID No.1的扩增是通过SEQ ID No.2所示的正向引物和SEQ ID No.3所示的反向引物进行的。

6.一种在包含非特异性诱导剂的培养基中在SEQ ID No.1的调控下表达基因的方法,其中所述方法包括以下行为:

a)在SEQ ID No.1下游的表达构建体中克隆所述基因;

b)用所述表达构建体转化宿主;和

c)在包含非特异性诱导剂的培养基中在所述SEQ ID No.1的调控下表达所述基因以用于生产异源蛋白。

7.如权利要求6中所述的方法,其中所述宿主是甲基营养型酵母,优选巴斯德毕赤酵母。

8.如权利要求6中所述的方法,其中所述异源蛋白选自包括人白蛋白和刺桐胰蛋白酶抑制剂的组。

9.如权利要求6中所述的方法,其中通过非特异性诱导剂进行所述表达。

10.如权利要求6中所述的方法,其中所述非特异性诱导剂选自包括山梨糖醇、葡萄糖、甘油、果糖、甘露糖醇、乳酸、蔗糖、淀粉、甲醇或它们的任意组合的组。

11.包含如权利要求1中所述的核苷酸序列的载体。

12.包含如权利要求11中所述的载体的转化的宿主细胞。

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