[发明专利]获得针对前加压素原或其片段的结合物的方法

权利要求书

1.获得能够结合与前加压素原(SEQ ID NO.1)的第146至163位氨基酸组成的C端部分相对应、但缺少第164位氨基酸的氨基酸序列中所含有的至少12个氨基酸长度的表位的结合物或结合物的混合物的方法，其中所述结合物是抗体并且结合物的混合物是抗体的混合物，所述方法包括下述步骤：

a)使用具有功能部分的开发物产生所述结合物，所述功能部分由与前加压素原(SEQ ID NO.1)的C端部分相对应、但缺少第164位氨基酸的氨基酸序列中所含有的至少12个氨基酸长度的氨基酸序列组成。

2.验证权利要求1的方法所获得的能够结合与前加压素原(SEQ ID NO.1)的第146至163位氨基酸组成的C端部分相对应、但缺少第164位氨基酸的氨基酸序列中所含有的至少12个氨基酸长度的表位的结合物或结合物的混合物的方法，其中所述结合物是抗体并且结合物的混合物是抗体的混合物，所述方法包括下述步骤：

b)确定所述结合物是否能够结合与前加压素原(SEQ ID NO.1)的C端部分相对应、但缺少第164位氨基酸的氨基酸序列中所含有的至少12个氨基酸长度的氨基酸序列；

c)从能够结合与前加压素原(SEQ ID NO.1)的C端部分相对应、但缺少第164位氨基酸的氨基酸序列中所含有的氨基酸序列的多种结合物中选择能够结合与前加压素原(SEQ ID NO.1)的C端部分相对应、但缺少第164位氨基酸的氨基酸序列中所含有的至少12个氨基酸长度的氨基酸序列的结合物；

d)以所述结合物进行结合测定，以确定生物样品中前加压素原或其至少12个氨基酸长度的片段的离体稳定性，所述片段包括和肽素，其中通过以下方式确定所述结合物与所述表位结合的特异性：与用于比较目的的另一种结合物的表位特异性进行比较；或者

e)进行结合测定，以确定生物样品中前加压素原或其至少12个氨基酸长度的片段的浓度，所述片段包括和肽素，其中通过以下方式确定所述结合物与所述表位结合的特异性：与用于比较目的的另一种结合物的表位特异性进行比较。

3.根据权利要求2所述的方法，其中步骤c)中，选择并且分离能够结合与前加压素原(SEQ ID NO.1)的C端部分相对应、但缺少第164位氨基酸的氨基酸序列中所含有的至少12个氨基酸长度的氨基酸序列的结合物。

4.根据权利要求2所述的方法，其中步骤d)和e)中，通过以下方式确定所述结合物与所述表位结合的特异性：与已知不需要前加压素原(SEQ ID NO.1)的所述第164位氨基酸来结合所述表位的结合物的表位特异性进行比较。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其中第163-164位氨基酸从与前加压素原(SEQ ID NO.1)的C端部分相对应的氨基酸序列中缺失。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其中第162-164位氨基酸从与前加压素原(SEQ ID NO.1)的C端部分相对应的氨基酸序列中缺失。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其中第161-164位氨基酸从与前加压素原(SEQ ID NO.1)的C端部分相对应的氨基酸序列中缺失。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述开发物的氨基酸序列和/或所述与前加压素原(SEQ ID NO.1)的C端部分相对应、但缺少第164位氨基酸的氨基酸序列中所含有的至少12个氨基酸长度的氨基酸序列是选自以下肽：由前加压素原(SEQ ID NO.1)的第146-162位氨基酸(SEQ ID NO.8)、第146-161位氨基酸(SEQ ID NO.9)、第146-160位氨基酸(SEQ ID NO.10)、第146-159位氨基酸(SEQ ID NO.11)、第146-158位氨基酸(SEQ ID NO.12)或第146-157位氨基酸(SEQ ID NO.13)组成的肽。

9.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述结合物能够结合于氨基酸序列，所述氨基酸序列具有至少12个与前加压素原(SEQ IDNO.1)的第146至163位氨基酸相对应的氨基酸序列中所含有的连续氨基酸。