[发明专利]一种人转铁蛋白乳腺特异性表达载体的构建及应用

权利要求书

1.一种利用转基因动物的乳腺组织生产人转铁蛋白的方法，包括利用含有人转铁蛋白基因表达盒的载体将人转铁蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物，使该转基因动物分泌乳汁，从乳汁中获得人转铁蛋白，其特征在于，所述的人转铁蛋白基因表达盒从5’到3’依次由启动子、人转铁蛋白基因和pcDNA3.1载体中携带的牛生长激素基因终止子组成，其中所述的启动子是山羊β-酪蛋白基因启动子，其长度为6.5Kb，序列如SEQ IDNO.1所示，其中包括启动子近端成分、远端长达4Kb的上游调控区和山羊β-酪蛋白第一内含子，第一外显子和第二外显子，所述的人转铁蛋白基因是序列表中SEQ ID NO.2所示，所述的终止子的序列为牛生长激素基因终止子，所述的含有人转铁蛋白基因表达盒的载体是真核表达载体pcDNA3.1，所述的哺乳动物不包括人。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述将人转铁蛋白基因表达盒转入哺乳动物基因组中获得转基因动物的方法包括将真核表达载体原核显微注射入哺乳动物的受精卵中，然后移植入假受孕动物中，从而得到转基因动物。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的哺乳动物是小鼠或奶牛。

4.一种用于制备转基因哺乳动物使其乳腺组织高表达人转铁蛋白的载体，其含有人转铁蛋白基因表达盒，其特征在于，所述的人转铁蛋白基因表达盒从5’到3’依次由启动子、人转铁蛋白基因和终止子组成，其中所述的启动子是山羊β-酪蛋白基因启动子，其长度为6.5Kb，序列如SEQ ID NO.1所示，其中包括启动子近端成分、远端长达4Kb的上游调控区和山羊β-酪蛋白第一内含子，第一外显子和第二外显子，所述的人转铁蛋白基因是序列表中SEQ ID NO.2，所述的终止子为牛生长激素基因终止子，所述的含有人转铁蛋白基因表达盒的载体是真核表达载体pcDNA3.1。